Цитопатическое действие вируса краснухи

Таксономия.
Семейство
Togaviridae.
Род
Rubivirus.

Морфология.
Вирион
вируса сферической форму. Геном вируса
представлен однонитчатой плюс-нитевой
РНК, окруженной капсидом с кубическим
типом симметрии и внешней липидсодержащей
оболочкой, на поверхности которой
находятся шипы. В структуре вириона три
белка: С, Е1 и Е2. Е1 и Е2— гликопротеины,
или шипы, расположенные во внешней
оболочке вириона.

Резистентность.
Вирус
чувствителен к эфиру. Малоустойчив
к действию физических и химических
факторов, неустойчив в окружающей среде.
Разрушение происходит под действием
органических растворителей, УФ-лучей,
солнечного света.

Антигенная
структура. Вирус
представлен одним серотипом. Он имеет
внутренний нуклеокапсидный антиген С,
выявляемый в РСК, и внешние антигены:
Е2, выявляемый в РН, и Е1, или гемагглютинин,
выявляемый в РГА и РТГА. Е2 — это
протективный антиген вируса.

Культивирование.
В
первичных культурах клеток вирус можно
обнаружить по феномену интерференции,
в качестве индуктора для суперинфекции
используют вирус ECHO-11
и вирус везикулярного стоматита. Вирус
краснухи вызывает развитие ЦПД и
образование бляшек под агаровым покрытием
лишь в некоторых перевиваемых культурах
клеток: ВНК-21, Vero,
RK-21,
SIRC,
а также в первичных культурах клеток
из тканей человеческого плода. Наилучшей
культурой для репродукции и выявления
ЦПД являются клетки ВНК-21. Вирус
размножается в цитоплазме клеток,
вызывая очаговую деструкцию клеточного
монослоя и образование цитоплазматических
эозинофильных включений.
Обладает
нейраминидазной активностью.

Эпидемиология.
Факультативный
возбудитель медленных вирусных
инфекций. Антропоноз.

Источник
— человек, опасный со 2 половины
инкубационного периода и в течение 7
дней с момента появления сыпи. Выделение
вируса из организма происходит с
носоглоточным
секретом, а также с мочой и испражнениями.

Пути
передачи:воздушно-капельный
и трансплацентарный.

Вирус,
персистирующий в организме больного с
врожденной краснухой, обладает повышенной
вирулентностью.

Патогенез и
проявления.
Две формы болезни: приобретенная и
врожденная.

Приобретённая
краснуха. Входными
воротами инфекции — слизистые оболочки
верхних дыхательных путей → вирус
в регионарные лимфатические узлы →
размножается → поступает в кровь →
разносится по органам → оседает в
лимфатических узлах и эпителиальных
клетках кожи → развивается иммунная
воспалительная реакция, сопровождающаяся
появлением пятнисто-папулезной сыпи.

Инкубационный
период
— от 11 до 24 дней

Проявления:
незначительное повышение температуры
и легкие катаральные симптомы →
конъюнктивит → увеличение затылочных
лимфатических узлов → пятнисто-папулезная
сыпь, расположенная по всему телу.

Вирус
выделяется из организма больных с
секретом слизистых оболочек верхних
дыхательных путей, а также с мочой и
фекалиями. Он исчезает из крови через
твое суток после появления сыпи, но
сохраняется в секрете слизистых оболочек
верхних дыхательных путей в течение 2
недель.

Иммунитет.
Стойкий, напряженный. В ходе заболевания
развивается вторичный иммунодефицит
клеточного типа.

Врожденная
краснуха —
это медленная вирусная инфекция,
развивающаяся в результате внутриутробного
трансплацентарного.

Проявления
развитие катаракты, глухоты и пороков
сердца. Внутриутробные пороки. Особая
опасность — заражение в 1 триместре
беременности. Тератогенное действие
обусловлено торможением митотической
активности клеток, ишемией плода,
цитопатогенным действием вируса на
клетки плода.

Иммунитет
менее стоек, так как формирование его
происходит в условиях незрелой иммунной
системы плода.

Прогрессирующий
краснушный панэнцефалит —
медленная вирусная инфекция,
характеризующаяся комплексом
прогрессирующих нарушений двигательной
и умственной функции ЦНС, и завершающаяся
летальным исходом.

Микробиологическая
диагностика. Выделение
вируса из смывов со слизистой оболочки
носа и зева, крови, мочи, реже — испражнений,
а также внутренних органов погибших
детей и на обнаружении антител в парных
сыворотках и цереброспинальной жидкости
при врожденной краснухе и прогрессирующем
краснушном панэнцефалите.

Выделение
вируса
путем заражения чувствительных клеток.
Индикацию вируса осуществляют на
основании интерференции с цитопатогенными
вирусами или по обнаружению ЦПД и в РГА.
Идентификацию
вируса
осуществляют в РН, РТГА, РИФ и ИФА.
(Серодиагностика)

Для
обнаружения антител
применяют РН, РСК, РТГА, ИФА. Диагностическое
значение имеет четырехкратное и
более увеличение титров антител в
динамике заболевания, а также определение
специфических IgM.
Обнаружение антител у беременных. Если
через 10—12 дней после общения беременной
с источником инфекции у женщины
регистрируется нарастание титров
антигемагглютининов в парных сыворотках,
а после 20-го дня определяются IgM,
то это подтверждает первичное инфицирование
и необходимость решения вопроса о
прерывании беременности. Обнаружение
у новорожденных специфических IgM
свидетельствует о перенесенной
внутриутробной инфекции.

Специфическое
лечение и профилактика. Лечение
симптоматическое.Специфического
лечения нет.

Профилактика:
защита женщин детородного возраста от
внутриутробного инфицирования плода,
вакцинация против краснухи в возрасте
12 месяцев, ревакцинации детей в 6 лет
и иммунизация девочек в 13 лет. Применяют
живые и убитые вакцины. Живая
вакцина, изготовленная
на основе аттенуированныых штаммов
вируса. Для проведения вакцинации
используют как ассоциированные
вакцины (паротитно-коревая-краснушная
вакцина, паротитно-краснушная вакцина),
так и моновакцины.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Источник

Материал
для исследования:

Смыв из
носоглотки Кровь

(в течение
продромального периода и не позже 30
часов с момента высыпания)

Цитопатическое действие вируса краснухи

Заражение культуры
ткани

(клетки
почки человека, F1,
Pн)

Іі. Обнаружение антител

Материал
для исследования:

Кровь (сыворотка)

1.
Реакция нейтрализации

2.
РСК (антиген из мозга мышей).

3.
РТГА (с эритроцитами обезьян).

Вирус краснухи

Краснуха —
острая вирусная болезнь, характеризующаяся
мелкопятнистой экзантемой, генерализованной
лимфаденопатией, умеренно выраженной
лихорадкой и поражением плода у
беременных. Вирус впервые выделен в
1961 г.

Таксономия.РНК-содержащий вирус относится к
семейству Togaviridae (от лат. toga — плащ), роду
Rubivirus (от лат. rubrum — красный).

Морфология,
антигенная структура.Вирионы имеют
сферическую форму диаметром 60-70 нм и
сложноорганизованную структуру, на
поверхности расположены редкие ворсинки
длиной 8 нм, содержат РНК. Вирус содержит
комплекс внутренних и наружных антигенов,
не имеет антигенных вариантов, обладает
гемагглютинирующей активностью. В
отличие от других тогавирусов вирус
краснухи содержит нейраминидазу.

Культивирование.Вирус размножается в первичных и
перевиваемых клеточных культурах с
образованием цитоплазматических
включений, иногда цитопатического
эффекта.

Резистентность.Вирус неустойчив в окружающей среде,
легко разрушается под действием УФ-лучей,
жирорастворителей и многих химических
веществ.

Восприимчивость
животных.Экспериментально инфекцию
удается воспроизвести на некоторых
видах обезьян. Вирус способен размножаться
на многих клеточных культурах, но
цитопатическое действие оказывает лишь
на немногих, в частности на культуре
ВНК-21 (хомячковые). Вирус краснухи
агглютинирует эритроциты голубей,
гусей, обладает гемолитическими
свойствами.

Эпидемиология.Краснуха — высококонтагиозная инфекция,
распространена повсеместно, поражает
преимущественно детей в возрасте 3-6
лет. Могут болеть и взрослые. Максимальное
число заболеваний регистрируется в
апреле—июне. Во время эпидемической
вспышки заболевают не только дети, но
и взрослые, особенно в организованных
коллективах. Особую опасность краснуха
представляет для беременных вследствие
внутриутробной инфекции плода. Вирус
краснухи выделяется во внешнюю среду
за неделю до появления сыпи и в течение
недели после высыпания.Источником
инфекцииявляется больной с клинически
выраженной или бессимптомной формой
инфекции. Вирусы выделяются со слизью
из верхних дыхательных путей, с фекалиями
и мочой.Механизм передачи возбудителя– аэрогенный (воздушно-капельный путь),
у беременных — трансплацентарный.

Патогенез и
клиническая картина.Вирус краснухи
при естественной инфекции проникает в
организм через слизистые оболочки
дыхательных путей, хотя в эксперименте
на добровольцах удавалось вызвать
заболевание и при интрадермальном
введении вируса. В дальнейшем наступает
вирусемия. Гематогенно вирус разносится
по всему организму, обладает дерматотропными
свойствами, вызывает изменения
лимфатических узлов, которые увеличиваются
уже в конце инкубационного периода. В
это время вирус можно выделить из
носоглотки. С появлением сыпи вирус в
крови и в носоглотке не обнаруживается,
но в некоторых случаях выделение его
продолжается 1-2 нед после высыпания.
Антитела в сыворотке появляются через
1-2 дня после высыпания. В дальнейшем
титр их нарастает. После перенесенного
заболевания антитела сохраняются в
течение всей жизни. Титр комплементсвязывающих
антител постепенно снижается. Иммунитет
стойкий пожизненный.

Вирус краснухиобладает тропизмом к эмбриональной
ткани, значительно нарушает развитие
плода. Частота поражений плода зависит
от сроков беременности. Заболевание
краснухой на 3-4-й неделе беременности
обусловливает врожденные уродства в
60% случаев, на 9-12-й неделе — в 15% и на
13-16-й неделе — в 7% случаев. При заболевании
беременных краснухой во время вирусемии
вирус попадает в плаценту, там размножается
и инфицирует плод. Инфекция вызывает
нарушения митотической активности,
хромосомные изменения, что приводит к
отставанию в физическом и умственном
развитии. При врожденной краснухе,
несмотря на наличие в сыворотке крови
антител к вирусу краснухи, возбудитель
длительное время (до 31 мес) сохраняется
в организме ребенка. Ребенок в течение
всего этого времени может быть источником
инфекции для других детей.

Инкубационный
периоддлится от 11 до 24 дней (чаще
16-20). Общее состояние больных краснухой
страдает мало, поэтому часто первым
симптомом, обращающим на себя внимание,
является экзантема. Больные отмечают
небольшую слабость, недомогание,
умеренную головную боль, иногда боли в
мышцах и суставах. Температура тела
чаще остается субфебрильной, хотя иногда
достигает 38-39°С и держится 1—3 дня. При
объективном обследовании отмечаются
слабо выраженные симптомы катара верхних
дыхательных путей, небольшая гиперемия
зева, инъекция сосудов конъюнктивы. С
первых дней болезни появляется
генерализованная лимфаденопатия.
Особенно выражены увеличение и
болезненность заднешейных и затылочных
лимфатических узлов. Иногда все эти
симптомы выражены слабо, и болезнь
обращает на себя внимание лишь при
появлении сыпи. Заболевание может
протекать в разных формах. Общепринятой
классификации клинических форм краснухи
нет.

Характерным
проявлениемкраснухи является
экзантема. Часто сыпь появляется уже в
первый день болезни (40%), но может появиться
на второй (35%), третий (15%) и даже на
четвертый день (у 10% больных). В некоторых
случаях именно сыпь обращала на себя
внимание, так как легкое недомогание
перед высыпанием не считалось каким-либо
заболеванием. Чаще сыпь вначале замечают
на лице, а затем в течение суток она
появляется на туловище и на конечностях.
В отличие от кори отсутствует этапность
высыпания. Сыпь более обильна на
разгибательных поверхностях конечностей,
на спине, пояснице, ягодицах. На лице
сыпь менее выражена, чем на туловище
(при кори наоборот). В отличие от скарлатины
элементы сыпи расположены на фоне
нормальной (негиперемированной) кожи.
Основным элементом сыпи является
маленькое пятно (диаметром 5—7 мм), не
возвышающееся над уровнем кожи, исчезающее
при надавливании на кожу или при
растягивании ее. Типичной является
мелкопятнистая сыпь (у 95%), хотя у отдельных
больных она может быть и крупнопятнистой
(диаметр пятен 10 мм и более). Наряду с
пятнами могут встречаться плоские
розеолы диаметром 2—4 мм, реже наблюдаются
папулы. Элементы сыпи, как правило,
раздельны, однако некоторые из них могут
сливаться, образуя более крупные пятна
с фестончатыми краями, но никогда не
образуется обширных эритоматозных
поверхностей (как это бывает при кори
или инфекционной эритеме), очень редко
выявляются единичные петехии (у 5%).

Иммунитет.После перенесенной инфекции иммунитет
стойкий пожизненный.

Лабораторная
диагностика.Исследуемый материал —
отделяемое носоглотки, кровь, моча,
фекалии, кусочки органов погибшего
плода. Вирус выделяют в культурах клеток.
Диагноз краснухи можно подтвердить или
посредством выделения и идентификации
вируса, или по нарастанию титров
специфических антител. Идентифицируют
выделенный вирус с помощью РТГА. Для
серодиагностики используют РИФ, ИФА,
РИА, РТГА. Серологические реакции ставят
с парными сыворотками с интервалом
10—14 дней. Диагностическим является
нарастание титра антител в 4 раза и
более. Выделение и идентификация вируса
довольно сложны и в практической работе
почти не используются.

Специфическая
профилактика и лечение.Основная цель
вакцинопрофилактики при краснухе
состоит в защите беременных женщин и
как следствие — в предупреждении
инфицирования плода и рождения детей
с синдромом врожденной краснухи.

Вакцинацию проводят
во многих странах. В России прививка
против краснухи не включена в календарь,
так как отечественная вакцина не
производится. Существуют зарубежные
краснушные живые аттенуированные
вакцины, выпускаемые в виде моно-, а
также ди- и тривакцины (паротит — корь —
краснуха). В большинстве стран проводят
двукратную иммунизацию детей младшего
и школьного возраста (18 мес и 12-14 лет).
Лечение симптоматическое.

Прогнозпри
краснухе благоприятный, за исключением
краснушного энцефалита, при котором
летальность достигает 50%. При врожденной
краснухе некоторые дефекты развития
(например, глухота) могут развиться
позднее (спустя год).

Конкретне цели:

Изучить
общую характеристику семейства
Togaviride.
Изучить
морфологию и антигенные свойства вируса
краснухи
Ознакомится
с эпидемиологией и основными клиническими
проявлениями краснухи.
Изучить
методы лабораторной диагностики
краснухи.
Особенности
диагностики краснухи у беременных и
новорожденных.
Изучить
методы лечения и профилактики краснухи.
Изучить
общую характеристику семейства
Paramyxoviridae
Изучить
морфологию и антигенные свойства вируса
кори.
Эпидемиология
и основные клинические признаки кори.
Методы
лабораторной диагностики, лечении и
профилактики кори.

Уметь:

Проводить
забор исследуемого материала для
лабораторной диагностики.
Владеть
методикой заражения культуры клеток
материалом, взятом от больного.
Владеть
методикой проведения метода интерференции

Теоретические
вопросы:

Характеристика
семейства Togaviride.
Особенности
морфологии рода Rubivirus
Эпидемиология,
патогенез и основные клинические формы
краснухи.
Методы
лабораторной диагностики краснухи.
Особенности
диагностики краснухи у беременных и
новорожденных.
Методы
лечения и профилактики краснухи.
Морфология
и антигенная структура вируса кори.
Методы
лабораторной диагностики кори.
Методы
лечения и специфической профилактики
кори.

Практические
задания, выполняемые на занятии:

Изучение
демонстрационных препаратов.
Разбор
схемы лабораторной диагностики краснухи.
Разбор
схемы лабораторной диагностики кори.
Зарисовка
демонстрационных микропрепаратов в
протокол.
Оформление
протокола.

Литература:

Пяткін
К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з
вірусологією та імунологією.– Київ.:
Вища шк., 1992.– 431с.
Воробьев
А.В., Биков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова
А.М. Микробиология.– М.: Медицина, 1998.–
336с.
Медицинская
микробиология /Под ред. В.И. Покровского.–
М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.– 768с.
Медицинская
микробиология, иммунология и вирусология
/Учебник для медицинских ВУЗов,
Санкт–Петербург «Специальная
литература», 1998.– 592 с.
Тимаков
В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология
/Учебник.– 2-е изд., перераб. и доп.– М.:
Медицина, 1983,- 512с.
Конспект
лекции.

Дополнительная
литература:

Тiтов
М.В. Iнфекцiйнi хвороби.- К., 1995.– 321с.
Шувалова
Е.П. Инфекционные болезни.- М.: Медицина,
1990.- 559 с.
БМЭ.-
Т. 1, 2, 7.
Гайдаш
І.С., Флегонтова В.В. Медична вірологія.–
Луганськ, 2002.– 357 с.

Короткие
методические указания к практическому
занятию:

В начале занятия
проводится проверка уровня знаний
студентов по теме.

Самостоятельная
работа состоит из изучения демонстрационных
препаратов и разбора схем лабораторной
диагностики энтеровирусных инфекций,
заполения протокола.

В конце занятия
проводится тестовый контроль и анализ
итоговых результатов самостоятельной
работы каждого студента.

Источник

Вирус относится к роду Rubivirus семейства Togavi-ridae и является возбудителем острого инфекционного заболевания, сопровождающегося лихорадкой и сыпью. Особенностью вируса краснухи является его способность передаваться трансплацентарно при инфекции у беременных женщин и вызывать врожденные уродства и гибель плода.

Морфология. Вирусные частицы имеют сферическую форму с диаметром 60—70 нм, нуклеокапсид с икосаэд-ральной симметрией с диаметром 30 нм. Вирус содержит липопротеидную оболочку, на поверхности которой находятся шипики длиной 8 нм с утолщением на концах.

Химический состав и физико-химические свойства. Вирус содержит однонитчатую РНК, белки, липиды (до 25% сухой массы), углеводы в составе гликопротеидов. Коэффициент седиментации вирионов 350 S, плавучая плотность в сахарозе 1,19 г/см3.

Геном. Геном представлен однонитчатой «плюс-нитевой» РНК с молекулярной массой около 3-Ю6 и коэффициентом седиментации 40 S. Порядок генов в геноме NH2-C-E2-E1-COOH.

Белки и антигены. Известны три структурных белка:

белок нуклеокапсида С с молекулярной массой 33 000 и два гликопротеида Е1 (молекулярная масса 58 • 103) и Е2 (молекулярная масса 42 000—47 000). Структурные белки транслируются с субгеномной иРНК с коэффициентом седиментации 24 S, соответствующей одной трети геномной (коэффициент седиментации 40S)РНК с З’-конца. Гликопротеиды являются протективны-ми антигенами, один из них является гемагглютинином, агглютинируя эритроциты 1—3-дневных цыплят и голубей. Имеется один антигенный тип вируса.

Устойчивость к физическим и химическим антигенам.Вирус чувствителен к эфиру, детергентам, инактивируется при температуре 5б°С в течение 1 ч, нестабилен при низких значениях рН. В замороженном состоянии сохраняет инфекционную активность годами.

Репродукция не изучена. Вирус размножается в первичной культуре клеток амниона человека, перевиваемых культурах клеток почек кролика (RK 13), Vero, BHK-21

и др. с ЦПД, которое проявляется в круглоклеточной дегенерации и появлении гигантских многоядерных клеток. В ряде культур вирус размножается без ЦПД и выявляется по феномену интерференции при заражении культур другими цитопатогенными вирусами (полиомиелита, ECHO 11, везикулярного стоматита, ныокаслской болезни и др.). В зараженных клетках образуются цитоплазматические ацидофильные включения. Вирус патогенен для обезьян макак, а некоторые штаммы — и для кроликов.

Патогенез, клиника. Вирус передается воздушно-капельным путем. Первичное размножение его происходит в шейных лимфатических узлах, откуда вирус примерно через неделю после заражения попадает в кровь. Через 2 нед появляется сыпь. За 7—9 дней до появления сыпи вирус можно обнаружить в отделяемом носоглотки, за неделю и в течение недели после появлении сыпи — в крови, при появлении сыпи — в моче и кале. Краснуха протекает как сравнительно легкое инфекционное заболевание. Болеют преимущественно дети младшего возраста, но могут болеть и взрослые. При заболевании беременных женщин вирус во время вирусемии проходит через плаценту и проникает в ткани плода, приводя к его гибели или тяжелым уродствам. Наибольший риск развития уродств при заражении матери в первом триместре беременности, в период формирования эмбриона, когда уродства возникют в 60% случаев. Поэтому краснуха в этом периоде является показанием для прерывания беременности. При перенесении заболевания во втором и третьем триместрах процент врожденных уродств снижается (примерно 25 и 8% соответственно). Уродства могут проявиться и в отдаленном среднем школьном возрасте.

Тератогенное действие вируса характеризуется триадой симптомов: 1) пороки сердца; 2) поражение органов зрения (двусторонняя катаракта, глаукома, близорукость и др.); 3) поражение органов слуха (глухота является наиболее частым пороком развития). Дети отстают в росте, массе тела, физическом и умственном развитии. Тератогенное действие обусловлено подавлением мито-тической активности клеток плода, цитодеструктивным действием вируса, поражением сосудов плаценты.

Иммунитет. Иммунитет после перенесенной инфекции стоек. Антитела класса IgM появляются при появлении сыпи, достигают максимального уровня через 1—2 нед

и исчезают через 2—3 мес. Антитела класса IgG появляются в первые дни после сыпи и достигают максимального уровня через 2—3 нед. Особенностью иммунитета является относительно высокий титр IgM и относительно низкий — IgG. Обнаружено нарушение клеточного иммунного ответа.

Эпидемиология. Путь заражения возушно-капельный. Высокая заражаемость, отсутствие изоляции больных, большое количество инаппарантных форм инфекции способствуют быстрому распространению ее и созданию иммунной прослойки среди населения еще в детском возрасте.Тем не менее женщины детородного возраста в 7 до 30% случаев являются серонегативными, т. е. не содержат антител к вирусу краснухи.

Лабораторная диагностика. Быстрые методы диагностики отсутствуют. Диагностика основана на выделении вируса из клинического материала и обнаружении антител к вирусу. Вирус может быть выделен из отделяемого носоглотки и крови до появлении сыпи; из крови, мочи и кала — после появления сыпи. Вирус выделяют путем заражения культур клеток РК 13, Vero, SIRK (клетки роговицы кролика), первичной культуры клеток амниона человека. Идентификацию выделенного вируса проводят в РТГА, а также в РГ по тесту интерференции. Вирус может быть выделен из разных органов новорожденных, внутриутробно зараженных краснухой, путем сокультиви-рования с чувствительными культурами клеток. При врожденной инфекции вирус длительное время выделяется из кала и мочи больных детей.

Основным методом серодиагностики является определение антител класса IgM, обычно используется ИФ, ИФА или РИА. Для выявления антител IgM применяют анти-IgM антитела (к фрагменту мю), при использовании всех реакций удаляют ревматоидный фактор. Широко применяют определение антигемагглютинирующих антител в РТГА с использованием эритроцитов голубей. Предварительно из сывороток удаляют ингибиторы путем обработки 20% каолином и изогемагглютинины путем обработки 50% взвесью эритроцитов. Используют также ИФА, РРГ. Нарастание антител класса IgG определяют с помощью этих реакций при использовании парных сывороток, взятых через 1—3 дня после появления сыпи (1-я сыворотка) и через 1—2 нед после появления сыпи (2-я сыворотка).

Профилактика. Проводится система карантинных мер в детских учреждениях. Целесообразна выборочная иммунизация девочек 12—14 лет, у которых нет антител к вирусу краснухи. Существуют убитые и живые вакцины, полученные из аттенуированных штаммов вируса, пассируемых при низкой температуре в культуре клеток почек зеленой мартышки и диплоидных клеток легких эмбриона человека.

Беременным женщинам не рекомендуется вводить иммуноглобулин, поскольку он не предупреждает вирусемию.

Дата добавления: 2015-05-10; просмотров: 3401; Опубликованный материал нарушает авторские права? | Защита персональных данных | ЗАКАЗАТЬ РАБОТУ

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Учись учиться, не учась! 10841 — | 8106 — или читать все…