Диф диагностика болезни крона и неспецифического язвенного колита

Определение лабораторных маркеров воспалительных заболеваний кишечника (антитела к Sacchаromyces cerevisiae и антитела к цитоплазме нейтрофилов), используемое для дифференциальной диагностики болезни Крона и неспецифического язвенного колита.

Состав исследования:

• Антитела к цитоплазме нейтрофилов, IgG (с определением типа свечения)
• Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgA
• Антитела к цитоплазме нейтрофилов класса IgA (АНЦА)

Синонимы русские

Серологические тесты при болезни Крона и неспецифическом язвенном колите, антитела к Sacchаromyces cerevisiae и антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА).

Синонимы английские

Inflammatory Bowel Disease, Serology panel, Anti-Saccharomyces cerevisiae antibodies (ASCA, ASCAs) and Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA, ANCAs).

Метод исследования

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) — группа состояний, при которых наблюдается нарушение иммунного ответа организма на антигены собственного кишечника и/или антигены нормальной микрофлоры собственного кишечника. В результате этого в кишечнике развивается и поддерживается воспалительный процесс. Выделяют две основные нозологические формы ВЗК: болезнь Крона (БК) и неспецифический язвенный колит (НЯК). Несмотря на некоторую общность патогенеза и принадлежность к одной группе болезней, НЯК и БК характеризуются разным прогнозом и разной тактикой лечения. Поэтому правильная дифференциальная диагностика двух болезней имеет принципиальное значение. Дифференциальная диагностика НЯК и БК носит комплексный характер, и, как правило, включает развернутое серологическое обследование. В настоящее время наиболее широко используются следующие маркеры:

1. Антитела к цитоплазме нейтрофилов

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) – это группа антител, направленных против различных компонентов нейтрофилов. Их определяют с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции (РНИФ). Кроме факта наличия АНЦА большое значение имеет тип свечения. Говоря о ВЗК, однако, важно различать «типичные» и «атипичные» АНЦА.

Различают два основных типа свечения АНЦА: цитоплазматический (в этом случае  говорят о наличии ц-АНЦА, или c-ANCA) и перинуклеарный (п-АНЦА, или p-ANCA). Цитоплазматический тип характеризуется зернистым, диффузным окрашиванием цитоплазмы. Показано, что основным антигеном для ц-АНЦА является протеиназа-3. «Типичный» перинуклеарный тип характеризуется гомогенным, кольцевидным окрашиванием перинуклеарной цитоплазмы. Показано, что основным антигеном для п-АНЦА является миелопероксидаза. Таким образом, ц-АНЦА и типичные п-АНЦА взаимодействуют преимущественно с цитоплазматическими антигенами. Указанные типы АНЦА – это хорошо известные маркеры первичных васкулитов.

Существует также третий тип свечения АНЦА, называемый «атипичным» перинуклеарным типом. Этот тип характеризуется неоднородным, широким, кольцевидным свечением периферической части ядра с множественными внутриклеточными включениями. Таким образом, в отличие от ц-АНЦА и типичных п-АНЦА, атипичные п-АНЦА взаимодействуют преимущественно с ядерными, а не с цитоплазматическими антигенами. Какой-либо специфический антиген для атипичных п-АНЦА, однако, до сих пор не найден.

Следует помнить, что клиническое значение атипичных п-АНЦА отличается от типичных п-АНЦА. Говоря о п-АНЦА при ВЗК (особенно при НЯК), имеют в виду именно атипичные п-АНЦА (но не типичные п-АНЦА). Часто эти антитела путают.

Так как антиген для атипичных п-АНЦА не выявлен, РНИФ остается единственным способом их выявления. Для сравнения: после того как было установлено, что в большинстве случаев антигеном для типичных п-АНЦА является миелопероксидаза, были разработаны более точные тест-системы на основе иммуноферментного анализа (ИФА). Сегодня ИФА является обязательным подтверждающим тестом при выявлении типичных п-АНЦА. В случае же с атипичными п-АНЦА такого подтверждающего теста нет.

Атипичные п-АНЦА обнаруживаются в крови 40-80% пациентов с НЯК и 5-25% пациентов с БК. Эти антитела также могут быть выявлены при других видах колита (например, эозинофильном и коллагенозном колите), других аутоиммунных заболеваниях (например, при первичном склерозирующем холангите — до 88%, и аутоиммунном гепатите I типа — до 81%). У здоровых людей атипичные п-АНЦА встречаются редко (1-3%).

2. Антитела к Sacchаromyces cerevisiae

Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) – антитела, направленные преимущественно против фосфопептидоманнана (компонента клеточной стенки, включающего маннозу) пекарских дрожжевых грибов Sacchаromyces cerevisiae. Манноза входит в состав не только пекарских дрожжевых грибов, но также и некоторых микобактерий и других микроорганизмов (например, дрожжеподобных Candida albicans). До сих пор патофизиологическая роль ASCA не до конца ясна.

Чаще ASCA обнаруживаются у пациентов с БК (50-80% случаев), чем у пациентов с НЯК (2-14%). Распространенность ASCA гораздо выше среди пациентов со спорадическими случаями БК и в семьях только с БК (63%), чем в семьях с БК и НЯК (около 33%).

По структуре ASCA относятся к иммуноглобулинам IgG и IgA классов. Приблизительно у 2/3 пациентов с БК и положительным результатом ASCA IgG также определяются ASCA IgA. До 20% пациентов с БК имеют только ASCA IgA, что объясняет необходимость исследовать оба класса антител.

ASCA также могут быть выявлены при других аутоиммунных заболеваниях (например, при аутоиммунном гепатите – до 20%, болезни Бехчета, первичном билиарном циррозе) и других заболеваниях кишечника (например, при целиакии). У здоровых людей ASCA встречаются редко (1-7%).

Из-за недостаточно высокой чувствительности и специфичности диагностическая роль отдельных тестов п-АНЦА и ASCA несколько ограничена. Большее значение имеет комбинация этих тестов. Результат ASCA+/атипичные п-АНЦА- более характерен для БК, в то время как результат ASCA-/атипичные п-АНЦА+ — для НЯК.

В нескольких исследованиях показано, что комбинация двух тестов позволяет различить НЯК и БК с чувствительностью 30-64% и специфичностью более 90%. Следует отметить, что отрицательный результат каждого теста в отдельности или в комбинации не позволяет полностью исключить ВЗК. Также наличие указанных антител в отдельности или в комбинации не позволяет со 100% уверенностью подтвердить диагноз ВЗК. Результат этого комплексного анализа оценивают с учетом всех значимых клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики болезни Крона и неспецифического язвенного колита.

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов воспалительного заболевания кишечника (ВЗК): диареи с примесью крови или слизи/констипации, боли в области живота, тенезмов, тошноты и рвоты, потери веса, лихорадки, анемии;
• при обследовании пациента с отягощенным наследственным анамнезом по болезни Крона или неспецифическому язвенному колиту.

Что означают результаты?

Референсные значения

Антитела к цитоплазме нейтрофилов, IgG (с определением типа свечения)

Титр: менее 1:40.

Результат: не обнаружено.

Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgA

0 — 20 RU/ml.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов класса IgA (АНЦА)

Положительный результат:

Характерная комбинация аутоантител при БК и НЯК:

Отрицательный результат:

• норма.

Что может влиять на результат?

• ASCA чаще выявляются в спорадических случаях болезни Крона или в семьях только с БК и реже в семьях с БК и НЯК.



Важные замечания

• ASCA могут быть выявлены у 1-7% здоровых людей, атипичные п-АНЦА – у 1-3%;
• результат исследования следует оценивать с учетом анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

[02-007] Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

[02-001] Анализ кала на скрытую кровь

[02-009] Копрограмма

[06-182] С-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

[13-071] Диагностика воспалительных заболеваний кишечника (антитела к бокаловидным клеткам кишечника и протокам поджелудочной железы)

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, врач общей практики, педиатр.

Литература

1. Papp M, Norman GL, Altorjay I, Lakatos PL. Utility of serological markers in inflammatory bowel diseases: gadget or magic? World J Gastroenterol. 2007 Apr 14;13(14):2028-36.
2. Iskandar HN, Ciorba MA. Biomarkers in inflammatory bowel disease: current practices and recent advances. Transl Res. 2012 Apr;159(4):313-25.
3. Lewis JD. The utility of biomarkers in the diagnosis and therapy of inflammatory bowel disease. Gastroenterology. 2011 May;140(6):1817-1826.e2.

1. Дифференциальная диагностика язвенного колита и Болезни Крона

Выполнили асс. Кисленко А.В.,
к.м.н. Канагатова Г.М.,
асс. Тулебаева А.К.

2. язвенный колит

хроническое воспалительнодистрофическое заболевание толстой
кишки с рецидивирующим либо
непрерывным течением, местными и
системными осложнениями. Язвенный
колит у детей распространён
преимущественно среди населения
индустриально развитых стран
(распространённость среди взрослых40-117:100 000).

3. Болезнь Крона

Хроническое, неспецифическое,
прогрессирующее, трансмуральное,
гранулематозное воспаление ЖКТ
В патологический процесс может вовлекаться
любой отдел пищеварительного тракта от
корня языка до заднепроходного отверстия.
Формы заболевания
Многоочаговая
Диффузная
Течение болезни Крона волнообразное, с
обострениями и ремиссиями

4. Этиология и патогенез НЯК

Этиология заболевания остаётся невыясненной.
Основные теории:
Инфекционная
Психогенная
Иммунологическая
Большое значение придают состоянию
нейроэндокринной системы, местной
иммунной защите слизистой оболочки кишки,
генетической предрасположенности,
неблагоприятным факторам внешней среды,
психологическим стрессам,
ятрогенномедикаментозным воздействиям.

5. Этиология и патогенез НЯК

При НЯК поражение начинается как
правило от прямой кишки — зубчатой
линии и распространяется в
проксимальном направлении. Если
поражается только прямая кишка, то
такое заболевание называется
язвенным проктитом. Распространение
патологического процесса происходит
постоянно так, что не остаётся ни
одного участка нормальной толстой
кишки.

6.

В отличие от болезни Крона при язвенном
колите в патологический процесс
преимущественно вовлекается только слизистая
оболочка и подслизистый слой. Форма и
размеры язв разнообразны, их края ровные,
подрытые. Наиболее характерными являются
узкие длинные язвы, расположенные вдоль
мышечных лент двумя — тремя параллельными
рядами. Дно мелких язв чистое, у крупных
покрыто сероватым налетом фибрина. Описаны
редкие случаи перфорации язв. Тяжесть
морфологических изменений нарастает в
дистальном направлении (наиболее выражены в
нисходящей и сигмовидной кишке). В 18-30%
может поражаться терминальный отдел
подвздошной кишки.
Нередко в толстой кишке обнаруживаются
псевдополипы.

7. Классификация НЯК

По локализации:
Неспецифический язвенный проктит и
проктосигмоидит
Неспецифический язвенный левосторонний
колит
Неспецифический язвенный тотальный колит
Неспецифический язвенный регионарный колит
По течению:
Острый неспецифический язвенный колит
Хронический неспецифический язвенный колит
Рецидивирующий неспецифический язвенный
колит

8. По тяжести:

Легкая форма- стул кашицеобразный <5 раз в сутки,
незначительная примесь крови и слизи в стуле,
отсутствие лихорадки, тахикардии, анемии,
удовлетворительное общее состояние
Средней тяжести -жидкий стул 5-8 раз в сутки примесь
крови и слизи в стуле, умеренная лихорадка,
тахикардия, анемия, удовлетворительное общее
состояние
Тяжелая форма -тяжелая диарея ( >8 раз в сутки);
значительная примесь крови, слизи и гноя в каловых
массах; лихорадка более 380С, тахикардия, анемия
(гемоглобин<90 г/л), общее состояние тяжелое или
очень тяжелое.

9. Этиология и патогенез болезни Крона

Этиология и патогенез заболевания
неизвестны
Обсуждают роль инфекции (микобактерии,
вирусы), токсинов, пищи, некоторых
лекарственных препаратов, рассматриваемых в
качестве пускового момента развития острого
воспаления.
Большое значение придают:
иммунологическим,
дисбиотическим,
генетическим факторам.
Установлена связь между системой
гистосовместимости HLA и болезнью Крона, при
которой часто выявляют локусы DR1 и DRw5.

10. Предполагаемая схема патогенеза Болезни Крона

11. Схема 2. Патогеническая модель болезни Крона.

12. Аутоиммунные заболевания, к которым относят болезнь Крона, характеризуются такими нарушениями в иммунном ответе, как: неспособность закон

   
    Недавно были обнаружены связи между системой
гистосовместимости HLA, язвенным колитом и болезнью
Крона. Изучение в больших группах хорошо подобранных
пациентов показало, что локус DR2 HLA имел высокую
связь с язвенным колитом и не был связан с болезнью
Крона. Напротив, болезнь Крона характеризовалась
связью с гаплотипом DR1 и DRw5. Генетические отличия
прослеживаются и в связи язвенного колита и болезни
Крона с ANCA (антинейрофильными цитоплазматическими
антителами). В ряде наблюдений было
продемонстрировано, что особые формы ANCA (р-АМСА)
связаны с язвенным колитом и не связаны с болезнью
Крона. В противовес ANCA в слизистой больных болезнью
Крона обнаружены клоны В-клеток (V 134 и VIIIa), не
встречающиеся при язвенном колите.

13. Клинические проявления НЯК

Симптомы:
жидкий или кашицеобразный стул с
примесью крови, гноя и слизи, иногда в
сочетании с тенезмами (болезненные,
ложные позывы к дефекации).
Частота стула может увеличиваться и
уменьшатся без видимых причин и вне
зависимости от проводимой терапии.
боль в животе (чаще в левой половине)
лихорадка
снижение аппетита
потеря веса
водно-электролитные нарушения различной
степени.

14. Внекишечные проявления НЯК

Внекишечные проявления язвенного колита
включают:
артриты (7-14% случаев),
спондилиты,
поражения органа зрения (ириты, коньюктивиты
и блефариты),
заболевания полости рта (стоматиты),
печени и жёлчевыводящих путей (холангит,
цирроз и холелитиаз),
а также заболевания кожи и подкожной
клетчатки (гангренозная пиодермия, узловая
эритема, узелковый полиартериит),
тромбофлебиты и тромбоэмболии, нефролитиаз.

15. Клинические проявления Болезни Крона

боль в животе,
примесь крови и слизи в кале,
диарея, часто сопровождаемая
болями при дефекации.
При преимущественном поражении
тонкого кишечника наблюдаются:
Боли в различных отделах живота
Вздутие, рвота.

16. Внекишечные проявления болезни Крона

К внекишечным проявлениям болезни Крона
относятся:
Кожные проявления
Поражения суставов
Воспалительные заболевания глаз
Заболевания печени и желчевыводящих путей
Васкулит (воспаление сосудов)
Нарушения гемостаза и тромбоэмболические
осложнения
Заболевания крови
Амилоидоз
Нарушения метаболизма костной ткани
(остеопороз)

17. Диагностика НЯК

При пальцевом исследовании прямой
кишки выявляют:
перианальные абсцессы,
свищи прямой кишки,
трещины анального прохода,
спазм сфинктера,
бугристость и утолщение слизистой,
ригидность стенки,
наличие крови, слизи и гноя.

18. Диагностика НЯК

При фиброколоноскопии отмечают:
отек и гиперемия слизистой
оболочки сигмовидной и прямой
кишок;
утрачивается сосудистый рисунок
характерный для нормальной
слизистой оболочки толстой кишки;
исчезает гаустрация толстой кишки
эрозии и язвы с подрытыми краями и
дном покрытым гноем и фибрином.

19. Эндоскопическая картина при НЯК

20. Эндоскопическая картина при НЯК

21. Рентгенологическое исследование НЯК

Обзорная рентгенография брюшной полости
позволяет диагностировать токсический
мегаколон, который наблюдается у 3-5% больных
с неспецифическим язвенным колитом
При ирригоскопии характерными
рентгенологическими признаками
неспецифического язвенного колита являются:
потеря гаустрации,
уменьшение просвета толстой кишки,
неравномерность рисунка слизистой оболочки
обусловленная мелкими
изъязвлениями(«пушистый вид»)

22. Рис.1 Неспецифический язвенный колит

23. Рис.2 Неспецифический язвенный колит

24. Лабораторные методы диагностики НЯК

У больных с НЯК выявляют:
Лейкоцитоз в различных формахгипо и диспротеинемия,
электролитные нарушения
Анемия

25. Микробиологическое исследование НЯК

Мазки и посев кала для исключения колита вирусной
этиологии, хламидиоза, патогенной флоры и
паразитарных поражений
Изменения облигатной микрофлоры, снижение
положительных находок Lactobacillus bifidus до 61% (у
здоровых до 98%)
резкое возрастание молочнокислых, кишечных,
палочек и энтерококков
рост патогенных стафилококков (превышает их
содержание по сравнению с нормой в 60 и более раз)
протея
Дислокация кишечной микрофлоры до желудка
включительно.

26. Диагностика Болезни Крона

клинико-анамнестические данные
результаты лабораторных
инструментальных
(рентгенологическое исследование,
эндоскопия с биопсией)
морфологических исследований

27. Рентгенологическое исследование при болезни Крона

ирригоскопия с двойным контрастированием
исследование пассажа бария,
интубационная энтерография —
исследование тонкой кишки с барием,
который вводят через назогастральный зонд
в двенадцатиперстную кишку).
Сцинтиграфия с меченными лейкоцитами
позволяет отличить воспалительное
поражение от невоспалительного; ее
используют в тех случаях, когда клиническая
картина не соответствует данным рентгена.

28. Рис. 3 Болезнь Крона

29. Рис.4 Болезнь Крона

30. Эндоскопическая картина при болезни Крона

Эндоскопически выделяют три фазы болезни:
Фаза инфильтрации -процесс локализуется в
подслизистой оболочке) слизистая оболочка имеет
вид «стёганого одеяла» с матовой поверхностью,
сосудистый рисунок не виден. В дальнейшем
появляются эрозии по типу афт с отдельными
поверхностными изъязвлениями и фибринозными
наложениями.
Фаза язв-трещин-отдельные или множественные
глубокие продольные язвенные дефекты,
затрагивающие и мышечный слой кишечной стенки.
Пересечение трещин придаёт слизистой оболочке
вид «булыжной мостовой», сужение просвета кишки.
Фаза рубцевания- участки необратимого стеноза
кишки

31. Рис.5 Эндоскопическая картина болезни Крона

32. Болезнь Крона. Эндоскопическая картина поперечной ободочной кишки

33. Лабораторные исследования при болезни Крона

ОАК снижение эритроцитов, гемоглобина,
гематокрита, ретикулоцитоз, лейкоцитоз,
увеличение СОЭ
Биохимический анализ кровигипопротеинемия, гипоальбуминемия,
гипокалиемия, снижение содержания
микроэлементов, повышение уровня
щелочной фосфатазы, а2-глобулина и Среактивного белка.

34. Дифференциальная диагностика

В отличие от неспецифического язвенного колита при болезни
Крона значительно чаще выявляют:
поражение тонкой кишки
прямая кишка при болезни Крона реже изменена
обычно отсутствуют массивные кровотечения
чаще наблюдаются перианальные изменения
поражение носит сегментарный характер (чередование зон
поражения и неизмененных участков слизистой)
наблюдаются свищи
при биопсии выявляют гранулемы или трансмуральное
повреждение
при эндоскопии имеется характерная эндоскопическая
картина

35. Дифференциальная диагностика Клинические признаки

Данные
НЯК
Болезнь Крона
Прямокишечные
кровотечения
Около 85% случаев
Около 40% случаев
Потеря веса
непостоянно
Всегда при пражениях
тонкой кишки
Анальные и
перианальные
проявления
Менее 20% случаев
В 20-80% случаев
Внутренние свищи
редко
В 20-40% случаев
Риск малигнизации
Прогрессивно
возрастает после 7-10
лет заболевания
Наблюдается при
длительности
заболевания боле 25
лет, реже чем при НЯК

36. Дифференциальная диагностика Макроскопические признаки

Данные
НЯК
Болезнь
Крона
Протяженность
поражения
Непрерывное
поражение
нарастающее от
дистальных отделов
прямой кишки в
проксимальном
направлении
Сегментарное поражение
Вид слизистой
Псевдополипы,
глубокие подрытые
язвы
Отдельные язвы, «булыжная
мостовая», свищи
Серозная оболочка
нормальная
Часто жировые подвески
спаяны
Длина кишки
Укорачивается
Доброкачественные
рубцовые стриктуры
Очень редко
нормальная
часто

37. Дифференциальная диагностика Микроскопические признаки

Данные
НЯК
Болезнь Крона
Глубина поражения
Слизистый и
подслизистый слой
Трансмуральное
Язвы
Широкие и глубокие
Поверхностные
«Резанные» трещины
редко
часто
Гранулемы
нет
всегда
Подслизистый фиброз,
лимфойдная
гиперплазия, отек,
расширение
лимфатических
сосудов,
невроматозная
гиперплазия
редко
всегда

38. Критерии морфологической дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона

Признак
НЯК
Болезнь Крона
Общаяя структура
СОТК
Значительно нарушена –
крипты извитые,
распределены
неравномерно, укорочены,
недостаточно muscularis
mucosa, расширены,
нарушена непрерывность
перикриптальных МФБ
В основном хорошо сохранена,
включая перикриптальные МФБ,
однако в рае язв, на месте
заживших язв общее строение
слизистой оболочки может быть
нарушено.
Воспалительный
процесс СОТК
Обычно диффузный,
равномерный
Часто отмечается разная степень
выраженности воспалительной
инфильтрации в разных участках
ткани, даже в пределах одного
образца, состав клеточного
инфильтрата, его распределение в
слизистой оболочке также
отличаются.

39. Критерии морфологической дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона

Признак
Глубина
поражения
НЯК
Поражается
преимуществ
енно СОТК
Болезнь Крона
Поражаются все слои кишечной
стенки
Эпителиоидно Не
-клеточные
характерны
гранулемы
Характерны: в слизистой оболочке
встречаются также
микрогранулемы,
гранулемоподобные образования,
т.е. разных размеров и формы
скопления макрофагов,
включающий иногда и крупные
эпителиоидные клетки
Васкулиты
Васкулиты, различные по степени
выраженности, характеру
воспаления и степени остроты,
иногда склероз стенки сосудов
Менее
характерны

40. Критерии морфологической дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона

Признак
НЯК
Болезнь Крона
Продукция
муцина
Характерно снижение
продукции муцина ввиде
уменьшения количества
бокаловидных клеток в
криптах, уменьшения
размерогв вакуолей,
содержащих муцин, изменения
состава муцина
Секреция муцина
сохранена, может
быть уменьшена
только в крае язв
PAS реакция
Снижение интенсивности
окраски муцина при PAS –
реакции, иногда сохранении
окраски только ободка вокруг
вакуоли муцина
Сохранение
интенсивности PAS реакции

41. Критерии морфологической дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона

Признак
НЯК
Болезнь Крона
Нейтрофильн характерна
ая
инфильтрация
Не характерна
Крипт абсцессы
Крипт-абсцессы
встречаются редко и
сопровождаются
гибелью эпителия
крипт
Характерно
перикриптальное
скопление нейтрофилов, их
лейкопедез, с
формированием крипт
абсцессов, т.е. скопление
лейкоцитов в крипте при
сохранении ее эпителия

42. Таб.1 Генетические отличия

Генетически Язвенный колит
й маркер
DR
DR2
p-ANCA
(+)60-70%
B-клоны
(-)
Болезнь Крона
DR1,DRw5
(-)
V143, VIIIa