Метод ифа к кори

Корь – высококонтагиозное антропонозное острое инфекционное заболевание с воздушно-капельным путем передачи. Возбудитель кори – РНК содержащий вирус (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus). Только 1% восприимчивых лиц не заболевает корью при первом тесном контакте с больным.

Корь начинается с продромального периода, для которого характерны повышение температуры тела до 38°С и выше, кашель, насморк, чихание, покраснение глаз и светобоязнь, энантема в полости рта (пятна Филатова-Коплика). С 4-5 дня болезни наблюдается поэтапное высыпание пятнисто-папулезной сыпи (на первый день сыпь появляется на лице и шее, на второй день – на туловище, на третий день – на ногах и руках), на месте сыпи остается пигментация и отрубевидное шелушение. Инкубационный период длится в среднем около 10 дней (от 7 до 18 дней) с момента инфицирования дыхательных путей и до повышения температуры.

Несмотря на наличие доступных высокоиммуногенных вакцин, корь все еще остается одной из основных причин детской смертности в развивающихся странах и периодически приводит к возникновению крупных вспышек в индустриально развитых странах. В 2010-2011 годах крупные вспышки кори были зарегистрированы в ряде стран Африки, Юго-Восточной Азии и Европы (Франция, Германия, Болгария, Румыния). Особенно тревожная ситуация сложилась в 2012 году на Украине, где за три месяца заболело более 10000 человек. В Российской Федерации, большинство административных территорий которой в январе 2011 года были сертифицированы на отсутствие эндемичной кори, ситуация осложнилась в 2011-2012 годах в Южном и Северокавказском Федеральных округах, в Москве, Санкт-Петербурге и ряде других городов.

Вирус кори присутствует в крови, носоглоточных выделениях и моче во время продромального периода и в течение 3-4 дней с момента появления сыпи. АТ к вирусу кори впервые можно обнаружить в крови с момента появления сыпи. Максимальный уровень содержания АТ IgM в крови приходится на 4-7 дни после появления сыпи, они сохраняются в течение 28 дней, в редких случаях их можно обнаружить спустя 8 недель с момента появлении сыпи. АТ IgG начинают вырабатываться с момента появления сыпи и достигают максимального уровня через 2 недели; их можно выявить в течение долгих лет после перенесенной инфекции.

Показания к обследованию. Больные с диагнозом «корь», «корь ?» и с другими клиническими диагнозами, имеющие пятнисто-папулезную сыпь и температуру тела 37,5°С и выше.

Дифференциальная диагностика. Заболевания, протекающие с мелкопятнистой экзантемой (краснуха, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, лекарственные и аллергические экзантемы, протекающие с повышением температуры тела).

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение вируса кори, выявление РНК вируса кори, обнаружение АТ к вирусу кори.

Материал для исследования

Сыворотка крови – выявление АТ;
моча, назофарингиальные смывы, лимфоциты периферической крови – выделение вируса кори;
мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление РНК вируса.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Лабораторная диагностика коревой инфекции в рамках Программы элиминации кори в РФ проводится только в вирусологических лабораториях Региональных центров по эпидемиологическому надзору за корью с помощью тест-систем, рекомендованных ВОЗ. Для лабораторной диагностики кори применяют главным образом выявление АТ к вирусу (серологическая диагностика). Для диагностики кори используют как обнаружение АТ отдельных классов (IgM и IgG), так и количественное определение специфических АТ в крови для установления их значимого прироста при одновременном исследовании двух проб, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции (парные сыворотки).

Для выявления вирусоспецифических АТ IgM и IgG в настоящее время используется преимущественно метод ИФА. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, простоте и скорости выполнения, возможности автоматизации исследования, метод доступен любой лаборатории. Для получения корректных результатов и облегчения их интерпретации большое значение имеет правильно выбранное по отношению к появлению клинических симптомов кори время забора образца.

Для выявления изменения уровня суммарных АТ с использованием реакции нейтрализации (РН) цитопатического действия вируса кори, требуется наличие двух образцов сыворотки крови, взятых у больного в остром периоде заболевания и на стадии реконвалесценции. Метод обладает 100% чувствительностью по отношению к клинически подтвержденным случаям. Этот тест не является легким в применении, потому что он требует наличия высококвалифицированного персонала, имеющего опыт работы с культурами клеток. Результаты анализа могут быть получены через 10 дней после получения сыворотки реконвалесцента.

Оценка изменения содержания специфических АТ с использованием метода РТГА также требует наличия двух образцов сыворотки крови, полученных у больного в остром периоде и на стадии реконвалесценции. У вакцинированных лиц метод демонстрирует 98% чувствительность. Этот тест также не является легким в применении, потому что требует высококвалифицированного персонала, а также наличие свежих эритроцитов обезьян. Результаты анализа могут быть получены через 2 дня после получения сыворотки реконвалесцента.

Выделение вируса кори выполняют на культуре клеток Vero. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток может занять несколько недель, поэтому не рекомендуется использовать этот метод для первичной диагностики инфекции, изоляция вируса кори проводится в специализированных лабораториях.

Выявление РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией не получило пока широкого распространения. Секвенирование генома вируса кори применяется в целях определения генотипа возбудителя кори. Генетический анализ позволяет сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы, что позволяет получить информацию о происхождении вирусов и проследить пути их передачи.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Для диагностики кори ВОЗ рекомендует использовать обнаружение вирус-специфических IgM методом ИФА в образце сыворотки крови, взятом после четвертого дня от момента появления сыпи. Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи.

При выявлении АТ IgМ к вирусу кори у пациентов с лихорадкой и пятнистопапулезной сыпью, обследуемых в рамках активного эпидемиологического надзора за корью, дополнительно проводится исследование для выявления АТ IgG методом ИФА в «парных сыворотках». Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи (1-я сыворотка) и не ранее чем через 10-14 дней от даты взятия первой пробы (2-я сыворотка).

Для определения напряженности иммунитета к вирусу кори ВОЗ рекомендует применять выявление АТ IgG в сыворотке крови методом ИФА.

Для выявления вируса кори и его РНК используют биоматериалы, взятые в продромальный период заболевания и в первые три дня после появления сыпи. При взятии образцов следует учитывать, что интенсивность экскреции вируса быстро падает.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Вирусоспецифические АТ IgM появляются в течение первых дней с момента высыпания, спустя месяц их уровень начинает быстро снижаться. Их наличие в крови пациента достоверно свидетельствует об острой свежей инфекции. АТ IgM также вырабатываются при первичной вакцинации и, хотя их уровень снижается быстрее, чем уровень АТ IgM, вырабатывающихся в ответ на инфицирование диким вирусом, специфические АТ IgM к дикому или вакцинному вирусу не могут быть разделены используемыми в рутинной диагностике методами. В этом случае для интерпретации полученных результатов следует обратиться к истории вакцинации конкретного пациента.

Поскольку исследование АТ IgM методом ИФА обладает максимальной чувствительностью между 4-м и 28-м днями от момента появления сыпи, то исследование образца крови, полученного в эти сроки, считается адекватным для диагностики кори. Повторное взятие образца крови может понадобиться в случае отрицательного результата выявления АТ IgM в первом образце крови, полученном в течение первых трех дней от момента появления сыпи. Повторное взятие крови для выявления АТ IgG выполняют через 10-14 дней после взятия первого. Нарастание титра специфических АТ IgG в 4 и более раза при одновременном исследовании обеих проб с использованием стандартных тестов является основанием для постановки диагноза «корь».

Источник

Антитела к кори – для чего и как проводят анализ?

Анализ на антитела к кори – исследование, которое проводят детям, которые рискующим заболеть корью, беременным, чтобы узнать о существующем риске для плода, взрослым, если есть риск заражения. Повышенный интерес врачей к результатам такой диагностики обусловлен опасностью кори.

Антитела к кори – что это значит?

Корь – это острое инфекционное заболевание с очень высокой вероятностью заражения при контакте с носителем вируса. Повышенная восприимчивость людей к вирусу кори компенсируется сохраняющимся пожизненным иммунитетом после перенесенного заболевания или сделанной прививки. Отвечают за специфический иммунитет антитела к вирусу кори.

Выработка антител к кори происходит:

при остром течении заболевания;
после вакцинирования;
после «скрытого» инфицирования корью, когда человек переболел незаметно для окружающих.

Как вырабатываются антитела в организме человека?

Антитела – это особые белки, связывающие антигены – чужеродные для организма вещества. При заболевании антигены попадают в организм естественным путем, при вакцинации – их вводят в составе вакцины. В организме выработка антител к инфекции осуществляется В-лимфоцитами и хранятся они в мембране этих лимфоцитов или плазме крови, а основная задача антител – иммунитет к заболеванию. К некоторым заболеваниям, например, к кори, защита вырабатывается пожизненная, к другим, например, к гриппу, постоянного иммунитета не вырабатывается.

выработка антител

В зависимости от возбудителя, антитела вырабатываются или сразу поле заражения, или после инкубационного периода. В настоящее время известно пять классов антител:

IgG – наличие таких антител говорит о выработанном стойком иммунитете, но их наличие не указывает на конкретного возбудителя, вырабатываются эти антитела спустя 2-3 недели после начала заболевания и могут сохраняться пожизненно.
IgЕ – наличие этих антител свидетельствует о присутствии в организме паразита и аллергических реакциях (ринит, отеки, высыпания).
IgА – данные антитела вырабатываются при респираторных инфекциях и при инфекционных и неинфекционных поражениях печени, начинают выявляться в крови через 1-2 недели после инфицирования и перестают выявляться через 2-3 месяца, постоянное присутствие в крови говорит о хроническом заболевании.
IgМ – присутствие этих антител говорит о присутствии в организме инфекции или о том, что человек совсем недавно переболел.
IgD – малоизученный класс антител, не используется в диагностике.

Когда нужен анализ на антитела к кори?

Делать анализ на антитела к кори часто приходится беременным женщинам, у которых отсутствует информация о том, переносили они эту инфекцию или нет, была ли сделана прививка, и при этом существует риск заражения. Для беременных корь опасна серьезными последствиями:

возможностью выкидыша;
преждевременных родов;
осложнениями течения болезни для самой женщины.

В некоторых случаях (на усмотрение врача) анализ на антитела к кори делают даже после перенесенной болезни или сделанной прививки, это необходимо, потому что:

у небольшого количества людей (около 10%) иммунитет после прививки не вырабатывается;
20-30% людей утрачивают коревой иммуноглобулин из-за лечения иммунодепрессантами, антибиотиками или по другим причинам.

Читайте также: Корь у детей норма

Определение антител к кори

Сдавать кровь на антитела к кори нужно, если

не известно, была ли сделана прививка;
необходимо подтвердить диагноз;
произошел контакт с возможным заболевшим;
при эпидемиологическом обследовании.

Корь в остром периоде проявляется очень ярко:

высокая температура;
коревая сыпь (пятна более 1 см в диаметре с папулой в центре);
дыхательные проблемы;
конъюнктивит;
светобоязнь;
отек век;
кашель и насморк.

кровь на антитела к кори

Анализ на антитела к кори – подготовка

По клинической картине корь легко определит врач, однако заражение окружающих происходит до появления высыпаний и об опасном заболевании они могут еще не подозревать. Если назначили обследование, нужно к нему подготовиться.

Анализ, определяющий антитела к кори, требует соблюдения ряда правил:

Первое требование – приходить на анализ на антитела к кори натощак, последний прием пищи до забора крови – за 8 часов, с утра можно только выпить чистой воды.
В день накануне анализа на антитела к кори нельзя пить спиртное, есть жирные, жареные и соленые блюда – это влияет на свертываемость крови и качества сыворотки.
Нельзя сдавать анализ на наличие антител к кори на фоне некоторых лекарств – о лечении должен знать врач и лаборант, берущий кровь, по возможности – за сутки прием медикаментов следует прекратить.

Как сдавать анализ на антитела к кори?

Приходить на анализ крови на антитела к кори нужно утром. Перед походом в лабораторию нежелательно делать зарядку, испытывать эмоциональные нагрузки. До забора крови желательно посидеть, отдохнуть и успокоиться 10-15 минут. В зимнее время года нелишним будет и согреться – чтобы при заборе крови не возникло проблем. Анализ крови на маркеры кори берется из вены, поэтому важно не волноваться, чтобы забор прошел быстро и безболезненно.

Анализ на антитела к кори – расшифровка

Исследование на антитела к вирусу кори, расшифровка которого длится до 48 часов, проводится в медицинском учреждении.

Чтобы расшифровать результат, рассматривают антитела классов IgG и IgМ:

оба показателя отрицательны – иммунитета к кори нет, инфекция в крови отсутствует;
оба показателя положительны – корь перешла в финальную стадию, иммунитет выработан;
IgG – положительный, IgM – отрицательный – иммунитет есть, кори нет;
IgG – отрицательный, IgM – положительный – иммунитета нет, корь в самой начальной стадии.

Антитела к кори – норма

Расшифровка анализа основывается на показателе титр антител к кори, который бывает:

менее 0,12 – в таком случае результат отрицательный;
в промежутке от 0,12 до 0,18 – этот результат считается сомнительным, анализ рекомендуется пересдать через 7-14 дней;
более 0,18 – положительные показатели антител к кори.

титр антител к кори

Антитела к вирусу кори IgG

Присутствующие в крови антитела к кори IgG свидетельствуют о перенесенном в прошлом заболевании или о присутствии инфекции в крови в настоящем времени, а также показывают напряженность иммунной системы против вируса кори. Наличие антител после вакцинации говорит о том, что иммунитет благополучно выработался. При заболевании антитела класса IgG появляются примерно через 3 недели после инфицирования, за 2 дня до появления сыпи.

Повторное вакцинирование от кори (при угасании иммунитета к заболеванию) приводит к быстрому росту антител IgG, которые обеспечивают защиту организма от опасной болезни. У младенцев до 6-7 месяцев наблюдается высокий уровень антител IgG – это материнские противокоревые антитела, которые защищают ребенка в первые месяцы жизни, но затем этот приобретенный от матери иммунитет угасает.

Антитела IgM к вирусу кори

Присутствующие в крови антитела класса IgM к вирусу кори свидетельствуют о начальной стадии заболевания и необходимости срочной медицинской помощи для предотвращения осложнений и заражения окружающих. После перенесенной кори антитела IgM сохраняются в крови несколько месяцев – по этому показателю можно понять, что человек недавно переболел опасным заболеванием.

Источник

Обследование на антитела к кори представляет собой мероприятие, проводимое в целях выявления антител класса G к данному вирусу. Именно они являются основными маркерами перенесенного заболевания. В качестве материала для исследовательских мероприятий используется кровь из вены. Возбудитель этого состояния – представитель семейства парамиксовирусов, способствующих активизации вирусов у детей и взрослых пациентов. Сама по себе корь – это острое инфекционное поражение, имеющее вирусную природу. Она выступает в качестве наиболее распространенной причины детской смертности в раннем возрасте.

Метод ифа к кори

Симптомы и признаки кори, характер высыпаний

Средняя продолжительность инкубационного периода составляет 1-2 недели. После этого происходит проникновение вирусного элемента в кровь и распространение по органам, тканям.

Начинается это заболевание со следующего набора признаков:

вялость, повышенная утомляемость,
болевые ощущения в голове, утрата аппетита,
насморк, сопровождающийся обильными выделениями слизи, в которой может присутствовать гной,
сухой кашлевой рефлекс,
осиплость голоса,
глазные поражения (конъюнктивит),
повышение телесной температуры, лихорадка.

Метод ифа к кори

На 3-5 сутки заболевания больному может показаться, что его самочувствие немного улучшилось. На этом этапе происходит снижение температуры. Но спустя пару дней все возвращается на круги своя. Более того, симптоматическая картина усугубляется дополнительными явлениями в виде пятен, которые напоминают скопившиеся зерна манки. Сыпь представлена несколькими волдырями, окруженными пятнышками. Болячки небольшие по размеру, но их много, и они яркие. Сыпь покрывает всю поверхность тела и может повлечь за собой кровоизлияния.

Болячки, формирующиеся в процессе прогрессирования этой болезни, имеют определенную последовательность развития.

В первые сутки болезни они локализуются за ушами, в области волосистой части головы, проявляются на шее, лице.
На второй день они поражают тело и верхнюю часть рук.
На следующем этапе попадают на нижние конечности и оставшиеся части рук, которые до этого не были поражены. На лице высыпания становятся более бледными.
На 4-е сутки течения заболевания наблюдается побледнение болячек в той же последовательности, в которой они появлялись. После себя они оставляют сильное шелушение и потемнение кожи.

Метод ифа к кори

Если не предпринять своевременных попыток по лечению этого заболевания, есть вероятность осложнений:

воспалительный процесс гортани (ларингит),
круп,
отит,
пневмония,
энцефалит коревой,
менингит.

Своевременное обнаружение первичных симптомов и последующая диагностика позволит искоренить недуг на ранних этапах.

Лабораторное подтверждение инфекции

Чтобы удостовериться в том, что пациент страдает именно от кори, а не от какого-то другого недуга, необходимо провести иммуноферментный анализ к вирусу. Он представляет собой лабораторное исследование, включающее определение специальных биохимических реакций. С их помощью появляется возможность выявления количества иммуноглобулинов в крови, т. е. антител – белков, вырабатываемых клетками крови.

Метод ифа к кори

Когда в человеческий организм проникают возбудители тех или иных инфекций, постепенно происходит связывание с ними иммуноглобулинов, которые далее их нейтрализуют. Сколько есть различных микробов, токсинов, вирусов, столько и иммуноглобулинов. Вместе с кровью они способны проникать даже в самые дальние уголки организма и настигать агрессоров-возбудителей.

Чтобы поставить диагноз «корь», специалисты чаще всего используют следующий комплекс и обследований:

общий анализ крови (ОАК), позволяющий отследить изменения ее структуры, состава,
иммуноферментный анализ на антитела (он расшифровывается как ИФА).

Чтобы диагностический процесс привел к желаемому результату – точному определению возбудителя, необходимо проводить его правильно.

Как подготовиться к сдаче анализов

Особых подготовительных мероприятий этот лабораторный анализ не предусматривает. Единственное, на что стоит обратить внимание – проведение натощак. Говоря простыми словами, между последним приемом пищи и проведением диагностики должен пройти временной промежуток от 8 часов. Накануне не рекомендуется употреблять какие-либо лекарства, а за несколько дней до сдачи ограничить себя в приеме жирной, острой, жареной пищи.

Метод ифа к кори

Как сдавать правильно

Суть исследования состоит в том, чтобы определить состояние здоровья больного и диагностировать заболевание. Для этого лаборант берет небольшое количество сыворотки крови и антигена, отправляет все это на поверхность специальной планшетки. Антитело и антиген, относящиеся к одному виду, сочетаются друг с другом «как ключ с замком», формируя единый иммунный комплекс. Впоследствии добавляется вещество, которое его окрашивает. На основании интенсивности полученного окраса происходит определение концентрации этих иммуноглобулинов в составе сыворотки.

Преимущество методики ИФА заключается в том, что она предполагает высокую чувствительность даже к невысокому содержанию иммуноглобулинов и имеет специфичность. Это может говорить только о высокой точности и достоверности полученных результатов. Обычно исследование длится 1-2 дня, а некоторые лаборатории готовы предоставить и срочный результат спустя несколько часов после обследования за дополнительную плату.

Расшифровка результата исследования

Расшифровка осуществляется на основании показателей титра антител, который может принимать следующие значения:

до 0,12 – результат носит отрицательный характер,
в диапазоне от 0,12 до 0,18 – сомнительный результат,
от 0,18 – положительный.

Метод ифа к кори

Если титр больше 0,18, т. е. ответ положительный, то он может говорить об остром периоде инфекционного процесса или о наличии иммунитета. Отрицательный тест свидетельствует об отсутствии иммунной защиты по отношению к вирусу, а также о ранней стадии заболевания. Более подробное описание значений результатов, выраженных в показателях IgG, IgM, представлено в табличной форме.

IgM	IgG	Характеристика результата
отрицательный	отрицательный	Это значит, что инфекция, как и иммунитет к возбудителю, отсутствует, т. е. человек обладает крепким здоровьем и может не переживать на этот счет.
отрицательный	положительный	Есть иммунитет к болезни за счет уже перенесенного заболевания или проведения вакцинации. Если показатель из второй колонки низкий, это говорит о резком ослаблении иммунитета и необходимости в повторной вакцинации.
положительный	отрицательный	Заболевание присутствует в начальной стадии и требует медицинского вмешательства для предотвращения его развития.
положительный	положительный	Болезнь перешла на среднюю или финальную стадию. Такие результаты будут сохраняться в течение нескольких месяцев после перенесенной кори.

Что делать, если результат сомнительный

Если исследование показало сомнительный результат, т. е. титр антител равняется 0,12-0,18 единиц, то для детализации сведений спустя 2 недели назначается проведение повторного анализа на антитела к кори.

Какой вывод можно сделать

Антитела к кори – защитные механизмы, предотвращающие возникновение и развитие этого недуга. Чтобы удостовериться в хороших показателях здоровья, нужно сдавать соответствующий лабораторный анализ. Он требует обязательной подготовки и соблюдения некоторых правил проведения.

Источник