Современные методы диагностики кандидоза

Диагностика кандидоза осуществляется несколькими лабораторными методами:

микроскопическое и культуральное исследования (посев);
иммуноферментный анализ;
полимеразная цепная реакция.

Каждый из методов обладает своими особенностями и позволяет выявить болезнетворные микроорганизмы, которые провоцируют развитие кандидоза, или молочницы. Окончательный диагноз устанавливается только после того, как собран биоматериал и сданы все допустимые лабораторные анализы на кандидозы, а также получена расшифровка с положительными результатами по каждому пройденному виду клинического исследования.

Как диагностировать молочницу правильно, и какие методы используются при этом?

Общие положения диагностики кандидоза

Для того чтобы получить достоверный диагноз и определить какие анализы сдают при молочнице, необходимо учитывать следующие положения, которые являются ключевыми при проведении диагностических тестов:

Диагностика включает обязательное дифференцирование носителей инфекции от непосредственно страдающих этим заболеванием пациентов. Известно, что около 25% всего населения являются носителями кандидозных грибов в полости рта, кишечнике и детрите. Кандиду относят к условно-патогенным микроорганизмам, поэтому она всегда присутствует даже в нормальной микрофлоре человеческого организма.
Важно учитывать количество полученного биологического материала для исследования, поэтому в ряде случаев необходимы повторный забор биожидкостей и биопсия слизистых оболочек.
Если клетки кандиды проявляются случайно, то рекомендуется пройти полное обследование. Это связано с тем, что простая молочница может стать предвестником таких серьезных заболеваний, как СПИД, сахарный диабет и рак крови. В некоторых случаях поражаются внутренние органы.
Во время проведения лабораторных анализов необходимо стремиться повысить чувствительность кандиды к антимикотическим препаратам. Кроме того, важно правильно идентифицировать виды грибов и их численность.
Молочница полностью не исключает наличие возможных сопутствующих заболеваний. Возможно, что наряду с кандидозным поражением имеются туберкулезные, онкологические, аутоиммунные, аллергические и другие патологии.

Важен тот факт, что при диагностике некоторых инфекционных заболеваний необходимо обращать внимание на наличие псевдомицелия у кандиды, так как только вид Candida Albicans способен его образовывать. Но другие формы гриба, которые его не имеют, тоже могут присутствовать в лабораторном образце биологической жидкости.

лабораторная диагностика

Если при микроскопии Albicans не выявлена, то необходимо провести дополнительные исследования, которые смогут идентифицировать другие формы гриба, вследствие чего диагностируется молочница. В частности, лучшие результаты дает метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Внешние критерии диагноза

Если имеет место орофарингеальная молочница, то необходимо учитывать наличие местных факторов риска:

съемные зубные протезы;
соски-пустышки;
наличие красного плоского лишая;
частое применение ингаляций с кортикостероидными препаратами.

Все это может вызывать дискомфорт в слизистой полости рта и жжение. Чаще всего наблюдаются фибринозные и атрофические изменения во рту.

Согласно стандарту диагностики кандидоза, в данном случае проводится цитологическое исследование образца биожидкости из полости рта. Если выявилось наличие псевдомицелия кандиды, то подтверждают предполагаемый диагноз.

При поражении грибом пищевода и желудка в качестве местных факторов риска рассматривают наличие ожогов, полипоза, дивертикулеза. Часто молочница развивается на фоне предшествующего оперативного вмешательства в ткани пищевода. В желудке может быть обнаружен эрозивный гастрит. Для проведения диагностики берется мазок-отпечаток слизистой оболочки желудка.

Кандидоз кишечника проявляется в виде абдоминальной боли; в стуле обнаруживают кровь и слизь. Также одновременно развивается системный кандидоз. Если имеет место кандидоз неинвазивный, то часто его сопровождают другие патологические бактерии (стафилококк, морганелла).

Показания к лабораторному исследованию

Микроскопическое исследование необходимо проводить в тех случаях, когда имеются явные признаки и симптомы развития инфекционного или воспалительного заболевания. Благодаря этому методу имеется возможность как выявить молочницу, так и определить настоящую этиологию патологического процесса. Клетки дрожжевого гриба кандиды легко обнаруживаются в биожидкости.

Посев на культуры рекомендуется проводить, когда молочница принимает рецидивирующий характер и длится достаточно долгий период времени. Важно проводить анализы на кандидозы, если их микроскопические формы и другие потенциальные возбудители заболевания не были обнаружены. Если проводилась антимикотическая терапия, то культуральный анализ показан в обязательном порядке. Он идентифицирует виды патологических микроорганизмов и помогает проявиться чувствительности к лекарственным препаратам антимикотического действия.

Кандиды питаются остатками тканей отмерших микроорганизмов. Они могут находиться на поверхности тела, коже и слизистых оболочках. Это говорит о том, что если во время диагностики обнаружены только ДНК кандиды, то этой информации для диагностики недостаточно. Какие анализы сдавать при молочнице, укажет лечащий врач во время осмотра, исходя из имеющихся жалоб и характерных клинических симптомов.

Микроскопическая диагностика

Лабораторная диагностика кандидоза имеет в своем арсенале несколько методов, с помощью которых можно быстро обнаружить дрожжеподобные грибы. Но лучшими из них признаны микроскопический анализ мазка, взятый с пораженных участков слизистой оболочки, и бактериологический посев. Это своего рода лабораторный «золотой стандарт», с помощью которого легко диагностируется молочница.

Хорошие результаты дает метод ПЦР (полимеразная цепная реакция), но для диагностики кандидоза его возможностей недостаточно. Рассмотрим микроскопические методы анализа более детально:

Микроскопия мазка. Благодаря ему проводится сравнительная характеристика бластоспор и псевдомицелия кандиды. Анализ на молочницу проводят с помощью фиксированных и нативных препаратов, которые окрашены по Граму, или в синий метиленовый. Именно обнаружение псевдомицелия говорит о том, что имеет место развитие инфекционного заболевания. Единственный недостаток микроскопии — это возможные визуальные ошибки при идентификации определенных видов бактерий. Диагностическая чувствительность этого метода тоже достаточно низкая и составляет максимально 40%. Для повышения чувствительности псевдомицелий клеток обрабатывают специальными красящими веществами. Благодаря контрастности проявляться под микроскопом они будут легко, отличаясь от других форм кандиды. Этот способ уже повышает чувствительность метода до 80%.
Бактериальный посев (культуральная диагностика). Благодаря этому методу исследования врачи имеют возможность не только выявить самого возбудителя инфекционного заболевания, но и определить его количественное соотношение. Успешно определяется и чувствительность кандидозных грибов к антимикотическим лекарственным препаратам. Важную роль в этом анализе играет предварительная подготовка, так как от количества бактерий в биологическом образце будет зависеть результат исследования. Диагностика молочницы занимает до 7 дней. Посев осуществляют в специальные плотные питательные среды. Чувствительность этого диагностического метода очень высока и достигает 95%. Микробиологическая диагностика кандидоза имеет свои недостатки — это высокая стоимость в некоторых клинических случаях и возможные проблемы при транспортировке биоматериала.

Диагностика кандидоза методом ИФА и ПЦР

ИФА, или иммуноферментный анализ, позволяет распознать большой спектр возбудителей различных заболеваний. Он основан на способности человеческого организма вырабатывать антитела в качестве ответной реакции на появление антигенов (чужеродных веществ в сыворотке крови).

Тест состоит из двух частей: иммунной и ферментной реакций. Обе являются взаимозависимыми, так как иммунная реакция выявляет количество патологических клеток, позволяет определить их вид и связать их воедино, а ферментная — помогает визуализировать полученный результат.

Благодаря тому, что организм человека вырабатывает антитела, метод ИФА осуществляется за счет их образования. 5 видов белковых структур участвуют в выявлении инфекции:

Иммуноглобулины (антитела)
IgA	IgM	IgG	IgD	IgE

Для диагностики определенного заболевания берут только 1 вид антител, который выявляется наиболее чувствительным к антигенам возбудителя.

Суть ферментативной реакции заключается в том, что благодаря особым ферментам имеется возможность превратить весь исследуемый материал (субстрат) в другое вещество (продукт реакции). Причем во время воздействия фермента есть только 1 реакция, а воздействие конкретного фермента возможно только на конкретный субстрат. Таким образом, происходит узнавание или родство материалов.

анализ крови

Преимущество метода ИФА заключается в том, что он позволяет не только выявить наличие возбудителя и диагностировать заболевание, но и определить степень его развития. Например, с помощью данной методики можно определить хроническую или острую стадии патологии.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) напрямую способна обнаруживать возбудителя инфекционного заболевания, причем чувствительность этого анализа составляет 90%. Особенно важно то, что он позволяет дифференцировать грибы кандида с псевдомицелием от тех, что его не имеют. Это принципиально важно для последующей интерпретации результатов и диагностики.

Как интерпретируют полученные результаты?

Если во время проведения одного или нескольких лабораторных исследований были обнаружены бластоспоры и псевдомицелий грибов кандиды, то это является явным диагностическим признаком воспалительного заболевания кандидоза. Диагностика молочницы, таким образом, упрощается.

Если наряду с полученными результатами имеются ярко выраженные симптомы и признаки воспалительного процесса (покраснение тканей, неприятный «рыбный» запах), то это дает возможность поставить этиологический диагноз с определением локализации очага воспаления (уретрит, баланопостит, вульвовагинит и т.д.). В этом случае необходимость продолжать лабораторные исследования полностью отпадает.

Если получен отрицательный результат во время микроскопического исследования, то это еще не значит, что молочница отсутствует. Важно провести дополнительные лабораторные тесты с помощью других диагностических методов. Это позволит выявить возбудителей заболевания, особенно если оно протекает в хронической рецидивирующей форме.

Если были обнаружены дрожжеподобные грибы Кандида в биоматериале пациентов с клинической симптоматикой, и при этом имеются явные признаки инфекционного заболевания, но возбудители инфекции, передающейся половым путем, отсутствуют, то можно говорить о достоверности диагноза кандидоз; диагностика, однако, может быть затруднена, если инфекция вызвана грибами non-albicans (псевдомицелий отсутствует), поэтому возможен отрицательный результат при исследовании методом ПЦР. Это связано с тем, что его реагенты направлены на выявление только ДНК кандиды. Важно учитывать, что наличие ее ДНК в сыворотке крови тоже не является основанием для постановки диагноза кандидозной инфекции, если клинические и лабораторные признаки инфекции отсутствуют.

Источник

В настоящее время в глобальном и мировом значении, одно из главных мест среди инфекционных заболеваний принадлежит микозам. Двадцать процентов всего человечества сегодня поражены различными оппортунистическими инфекциями, в частности теми недугами, возбудителями которых являются микробы — это последние данные Всемирной Организации Здравоохранения за последние десять лет. Точная и своевременная диагностика кандидоза имеет важное значение на пути выздоровления человечества в целом, поэтому сегодня ей уделяется огромное внимание.

Читайте также: Кандидоз у собак что это

Всего насчитывается около пятисот различных видов грибов, способных вызвать инфекционные поражения у человека, но наиболее частым является дрожжеподобный грибок «Кандида альбиканс». Отсюда и название заболевания — кандидоз или молочница. Он характеризуется поражением слизистых оболочек и кожных покровов. Интересен тот факт, что как только человечество начало использовать антибиотики, частота поражений данным недугом значительно возросла. То есть при ослаблении организма и подавлении иммунной системы опасность поражения этим возбудителем вырастает в разы. Как выявить молочницу и как её диагностировать? Только точные анализы на кандидозы позволят выявить природу гриба и интенсивность размножения колоний.

Причины возникновения

Считается, что Candida постоянно кандидоз в малых количествах живёт в организме человека. Эти мельчайшие организмы относятся к микрофлоре условно-патогенного свойства, их активность сдерживает здоровый иммунитет человека, но при малейшем его ослаблении, грибок начинает бурно размножаться, нарушая баланс и активизируясь в самых уязвимых местах организма. Диагностика молочницы обязательна при первых признаках дискомфорта.

Одними из самых распространённых форм является оральное и вагинальное поражения. К женской форме относится вагинальный кандидоз, который способен возникнуть на любом периоде жизни. Оральная форма проявляется в основном у грудничков или новорождённых. Имеется также и мужской вид, который возникает после полового акта. Чаще всего это происходит после незащищённого секса с больной партнёршей.

Что является наиболее распространёнными причинами возникновения этого негативного явления?

К факторам, способным спровоцировать кандидоз можно отнести несколько причин:

Сильное переохлаждение организма, длительное стрессовое состояние, гормональные изменения, беременность;
Самым негативным образом влияет на организм длительное употребление некоторых лекарственных препаратов, особенно антибиотиков, под действием которых погибает микрофлора полезного характера. Именно она осуществляет контроль над ростом и размножением грибов этого вида, а при её уничтожении начинают развиваться патогенные бактерии, что приводит к кандидозу;
Частой причиной проявления болезни является хронические формы венерических недугов, ВИЧ;
Эндокринные заболевания в виде диабета, ожирения, нарушений в щитовидной железе также способны спровоцировать активность грибов;
Среди причин, которые могут вызвать данную болезнь можно назвать жаркий климат, неудобное и синтетическое бельё, несоблюдение правил гигиены.

Кандидоз диагностика и симптоматика

Болезненные проявления могут выражаться по-разному, это зависит от локальности инфекции и очагов, и только диагностика молочницы позволит определить тип гриба.

Рассмотрим несколько вариантов:

При поражении слизистой оболочки ротовой полости при детской молочнице или оральной форме, когда заражение происходит непосредственно от матери во время родовой деятельности, очаги у новорождённого формируются на слизистых рта, щёк, языке, дёснах. Это выражено белым творожистым налётом. Постепенно их количество растёт, образовываются эрозии и плёнки. При хронической форме часто поражаются носоглотка и даже пищевод.
Влагалищный (вагинальный) – это наиболее частый вид инфекции женского типа, которое наиболее распространено у женщин до 45 лет, но может возникнуть у девочек подростков и у мужчин. Женский вагинальный кандидоз выражается на наружных половых органах и внутри влагалищной области, мужской поражает головку члена и затрагивает крайнюю плоть. Нужно отметить, что беременные женщины страдают от кандидоза в несколько раз чаще, это связано с резким повышением гормонального фона и одновременно ослабленным иммунитетом.

Симптомы молочницы у женщин:

изменение слизистых на половых органах в виде отёков и покраснений;
неприятные ощущения, которые могут усилиться к вечеру, если несвоевременно проведены меры по гигиене, особенно в период менструаций, при переохлаждении организма;
кислый запах во время обильных творожных выделений, а также чувство жжения при акте мочеиспускания;
дискомфорт и боль при половом акте.

Симптомы у мужчин:

изменение внешнего вида полового члена из-за отёка крайней плоти, покраснения головки;
зуд и болезненные ощущения при прикосновении;
налёт творожистого белого вида на самой головке;
неприятные ощущения и боль во время секса и при мочеиспускании.

Симптоматика кишечного кандидоза (дисбактериоза) может возникнуть как сопровождающие признаки при вагинальной форме или как отдельное заболевание. Дисбактериоз часто можно наблюдать после кишечных инфекционных поражений или после длительного приёма антибиотиков. Грибы Candidа локализуются в области тонкого кишечника.

Исследования микроорганизмов в лабораторных условиях: методы и пути распознания

Лабораторная диагностика кандидоза шагнула далеко вперёд, сегодня есть несколько способов распознания и выявления грибов кандида, и все они отличаются не только по названию, но и по принципу обнаружения патогенных микробов в организме человека. Какие анализы сдавать при молочнице?

Одними из самых известных и распространённых методов выявления молочницы у женщин и мужчин являются посев, иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Исходя из особенностей анализов и степени заболевания, специалист решает, каким методом следует обследоваться, так как каждый из них имеет свои положительные и отрицательные стороны. Для более точной диагностики и снижения риска ошибочного результата, обычно назначается сразу несколько способов анализов, чтобы выявилось максимальное количество информации.

В качестве материала для исследования может выступать:

мазок из уретры или области влагалища, рта или ушей;
пробы мокроты рта, цервикального канала или дыхательных путей;
кал, моча, кровь из вены, гнойные массы из глаз, кожные покровы;
язвы, отделяемые от роговицы глаз, сера из ушей, соскобы с миндалин, ногтевые пластины;
спинномозговая жидкость, а также вещество из суставов, плевральное или внутрибрюшное.

Такое разнообразие материала для обследования на предмет выявления кандидоза и степени запущенности инфекции часто не требуется. Тем более, что в данном случае нужна специальная подготовка больного. В большинстве случаев, больному предлагается провериться сдачей анализов крови мочи и каловых масс, а также обязательным мазком из зоны локализации болезни.

Обычно врач предупреждает о некоторых ограничениях перед сдачей анализов, это позволяет точнее установить правильный диагноз. Для этого рекомендуется:

не употреблять за неделю до забора анализов антибиотики и противогрибковые лекарства;
воздержаться от алкогольных напитков и половых сношений за сутки до анализа;
для женщин будет рекомендован наиболее благоприятный день менструального цикла;
для обоих полов будет актуальным воздержание до анализа от мочеиспускания.

Современные методы диагностики

Проявляющееся заболевание может иметь смешанный характер, поэтому очень важно понять, какой именно вид грибка кандида его вызвал. Это позволит назначить эффективное лекарство для скорейшего подавления микроорганизмов.

ПЦР — полимеразная цепная реакция на кандидоз. Такая диагностика молочницы считается наиболее эффективной и объективной по сравнению с остальными молекулярными биологическими исследованиями. Ее назначают при молочнице и мужского и женского типа, при хронических формах и частых рецидивах. Однако точность показаний результатов обследования не всегда позволяет распознать причину болезни, хотя грибок альбиканс чаще всего, почти в 90 случаях является виновником поражения.
Среди ряда способов выявления гриба можно выделить культуральное исследование. Оно позволяет с большой вероятностью определить род и вид грибов, а также чувствительность бактериальной флоры. Посев производится на несколько часов инкубации при определённой температуре (37 градусов) и через определённые периоды проверяется рост колоний.
Метод экспресс-диагностики позволяет за сутки понять не только наличие кандидоза у пациента, но и определить эффективность роста колонии микроорганизмов.
Существует также метод серологической диагностики, когда при поражениях висцерального характера, явных признаков кандидоза не выявляется.

Микробиологические анализы на кандидоз и необходимый материал

При заборе кала на анализы требуются ограничения и запреты, касающиеся лекарственных препаратов: противомикробных, пробиотиков, слабительных, ректальных свечей и различных масел. Кал после клизменных процедур также не годен для обследования, а также он не должен собираться с тканевых поверхностей, например памперсов. Ограничений в рационе нет, и ограничивать себя в привычных продуктах питания не нужно, но учитывать вышеизложенные рекомендации необходимо для точности результатов анализов.
Моча должна быть собрана только в стерильную ёмкость. Хранение её ограничено до двух суток в холодильнике. После химиотерапии материал сдают только по истечении трёх суток.
Выделения из глаз производится специалистом при помощи стерильного ватного тампона. Материал забирается из очага наивысшего воспаления и доставляется в лабораторию в течение нескольких часов. То же касается и выделений из носовых пазух и носоглотки.
Материал для анализов из влагалища собирается с изменённых участков слизистой оболочки, после этого маркируется и, тщательно упакованным, доставляется в лабораторные условия.
Секрет предстательной железы доставляется в лабораторные условия за три часа, не дольше.
Диагноз подтверждается после того, как получен положительный результат с поражённых участков тканей, после точной микробиологической диагностики кандидоза независимо от места забора материала. После этого устанавливается динамика процесса инфекции в организме и назначается лекарственная терапия.

Для точного диагноза применяется микологический метод, а также культуральный, позволяющий выявить видовую принадлежности гриба и его реакцию на препараты, называемых антимикотиками.

Итог

Лечение кандидоза основывается цели на трёх основных целях: коррекция болезней, выявленных, как фоновые, правильное назначение антимикотических препаратов и восстановление иммунитета и микрофлоры кишечника. При этом следует обязательно учитывать индивидуальные особенности больного, чтобы не вызвать побочных эффектов, и по возможности использовать весь потенциал современных возможностей диагностики и лечения такого явления как кандидоз.

Источник