Вирусологический метод исследования кори

Диагностика кори с использованием клинико-эпидемиологических данных является ведущей на современном этапе. Специфическая диагностика (выделение и идентификация вируса) имеет вспомогательное значение. Серологические методы исследования используются для ретроспективной диагностики кори. На сегодняшний день средства специфической терапии заболевания отсутствуют. Симптоматическое лечение кори оказывает положительное влияние на течение заболевания.

Рис. 1. На фото корь у детей.

Диагностика кори

Диагностика кори на основании эпидемиологических данных

При сборе анамнеза заболевания уточняется, болел или нет больной корью в прошлом (корь у лиц, ранее перенесших заболевание, протекает в атипичной форме).
Уточняется, вакцинирован или нет ребенок от кори (факт вакцинации позволяет практически полностью исключить заболевание).
Определяется факт нахождения больного в контакте с больным корью.

Диагностика кори с применением клинического метода

Клинический метод диагностики заболевания в современных условиях является ведущим. Из множества симптомов кори опорными в клинической диагностике следует считать:

Острое начало заболевания.
Нарастающие симптомы насморка, кашля и конъюнктивит (триада Стимсона).
При кори на слизистой оболочке щек, десен, губ и реже конъюнктивы появляются очаги энантемы, имеющей вид мелких, белого цвета точек, которые окружены гиперемированным венчиком (пятна Бельского-Филатова—Коплика). Этот симптом появляется только при кори и позволяет в ранние сроки диагностировать заболевание.
Одновременное, с повторным повышением температуры (вторая волна лихорадки), поэтапное появление сыпи, которая располагается на фоне неизмененных кожных покровов. Сыпь склонна к слиянию, а в стадии завершения заболевания отмечается пигментация и шелушение.

Рис. 2. Пятна Бельского-Филатова-Коплика на слизистой щек и коревая энантема в области неба — опорные симптомы в клинической диагностике кори.

Рис. 3. Конъюнктивит, отечность нижних век и поэтапное появление сыпи — важные симптомы при клинической диагностике кори.

Рис. 4. Сыпь, склонная к слиянию и пигментации — важный диагностический признак заболевания.

Диагностика кори с использование микроскопического метода исследования

Метод простой микроскопии

При кори в местах, где скапливаются лимфоциты, образуются гигантские клетки Уортина-Финкельдея. Они содержат огромное число ядер (от 50 до 100) и мелкие включения, локализующие в цитоплазме и ядрах. При кори такие клетки образуются в миндалинах, лимфоузлах, тимусе, селезенке и аппендиксе. Их можно выявить в мазках, взятых со слизистой оболочки ротоглотки, мокроты и носовой слизи в первые два дня периода высыпания.

Рис. 5. На фото гигантские многоядерные клетки Уортина-Финкельдея.

Метод люминесцентной микроскопии

С целью обнаружения гигантских клеток применяется метод люминесцентной микроскопии мазков-отпечатков, взятых со слизистой оболочки носовой полости. Мазки окрашиваются акридиновым оранжевым, что позволяет увидеть ярко-красное свечение гигантских многоядерных клеток.

Рис. 6. Применение метода люминесцентной микроскопии при диагностике кори.

Диагностика кори с использованием серологических методов исследования

Благодаря серологическим исследованиям выявляются и изучаются антитела и антигены в сыворотке крови больного. В их основе лежат иммунные реакции организма. Специфичность данного вида исследования не достигает 100%, поэтому результаты серологический реакций оцениваются только с учетом клинической картины заболевания.

Диагностика кори на поздних сроках заболевания осуществляется с помощью реакций агглютинации: РПГА, РНГА и РА. В основе таких реакций лежит способность корпускулярных антигенов склеиваться с помощью антител. Диагноз кори подтверждается, если нарастание титров антител через 2 — 3 недели будет в 4 раза выше, по сравнению с титрами антител, определяемых в первые дни заболевания.
Иммуноферментный анализ (ИФА) — чувствительный, специфичный и относительно недорогой тест. Для его проведения используются белковые антигены вирусов кори, с помощью которых измеряются сывороточные иммуноглобулины класса M, уровень которых повышаются в крови в первые 7 — 10 дней от начала заболевания в 8 — 10 раз.

Вирусологическая диагностика кори

В обычной лабораторной практике метод выделения вирусов и их идентификация не применяются, хотя обнаружить возбудителей кори можно за 2 — 3 дня до начала стадии высыпания. Материалом для исследования может стать кровь больного и выделения из носоглотки.

Диагностика кори с применением экспресс-диагностики

Экспресс-методы лабораторной диагностики кори позволяют за несколько минут определить антигены, локализованные в цитоплазме эпителиальных клеток дыхательных путей. Антигены, меченные флуорохромами, издают специфическое свечение при воздействии ультрафиолетовых лучей люминесцентного микроскопа. При использовании реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) врач может получить результаты уже через 2 — 6 часов.

Дифференциальная диагностика кори

Постановка диагноза типично протекающей кори не представляет трудностей. Выраженный конъюнктивит, отек нижних век, катар верхних дыхательных путей, коревая энантема и наличие пятен Бельского-Филатова-Коплика — основные симптомы заболевания в начальном, катаральном периоде. Проводить дифференциальную диагностику в этот период следует с ОРЗ и гриппом.

В период высыпания корь необходимо дифференцировать с заболеваниями, протекающими с сыпью: краснухой, ветрянкой, скарлатиной, инфекционной эритемой Розенберга и Чамера, энтеровирусной и медикаментозной экзантемой, сывороточной болезнью, синдромом Стивенса-Джонсона.

Рис. 7. Схематическое расположение элементов сыпи при разных инфекционных заболеваниях.

Рис. 8. На фото сыпь при краснухе. Она появляется и распространяется по всему телу уже в первый день заболевания. Не имеет сливного характера, как при кори. После себя не оставляет пигментации и шелушения.

Рис. 9. Сыпь при скарлатине мелкоточечная, располагается на гиперемированном фоне, что создает картину эритемы. Сыпь покрывает все тело за исключением области носогубного треугольника, сгущается в области естественных складок кожи. После исчезновения сыпи начинается шелушение кожи.

Рис. 10. На фото инфекционная эритема. Сыпь яркая, группируется в кольца, бледная по центру.

Рис. 11. Сыпь при ветрянке носит генерализованный характер. Ее основными элементами являются розеолы (розовые пятнышки) и везикулы (пузырьки наполненные жидкостью).

Рис. 12. Энтеровирусная экзантема.

Рис. 13. На фото сыпь при сывороточной болезни.

Рис. 14. На фото сыпь при синдроме Стивенса-Джонсона. Язвенно-некротические поражения локализуются вокруг носа, глаз, рта, заднего прохода и половых органов. На коже туловища превалируют большие буллезные элементы.

Диагностика кори у ранее привитых детей

Если в организме ребенка сохранилось небольшое количество антител, то при заражении коревыми вирусами, заболевание у них будет протекать в стертой форме. Инкубационный период при стертом течении удлинен, отсутствуют типичные признаки заболевания, течение стертое, нарушена морфология и этапность высыпаний.

к содержанию ↑

Лечение кори

Лечение кори в условиях стационара

При тяжелом и осложненном течении заболевания больные госпитализируются. Таким детям требуется высококвалифицированная медицинская помощь. Госпитализации также подлежат больные, постоянно пребывающие в закрытых коллективах.

В условиях стационара лечение направлено на борьбу с интоксикацией, воспалением, аллергией и шоком. При присоединении вторичной инфекции назначаются антибактериальные препараты. Противокоревой иммуноглобулин для лечения заболевания не применяется. Он вводится только с профилактической целью.

Лечение кори в домашних условиях

При неосложненном течении кори лечение больного организуется в домашних условиях под постоянным наблюдением участкового врача. Уход за больным и организация правильного полноценного питания занимает первостепенное место в комплексе лечебных мероприятий.

Кровать больного должна находиться в таком положении, чтобы дневной свет не попадал больному в глаза. В вечернее время искусственный свет не должен раздражать глаза больного.
На весь лихорадочный период и в последующие 2 — 3 дня назначается постельный режим.
Ларингит и явления тяжелого изнуряющего кашля служат показанием для увлажнения воздуха в помещении. Увлажнение можно обеспечить путем развешивания в комнате больного влажных простыней или применения увлажнителей воздуха.
Ребенок должен получать достаточное количество жидкости, включая фруктовые соки, морсы и минеральную воду.
В острый период пища должна быть полужидкой, легкоусвояемой, богатой витаминами и соответствовать возрасту больного.

Уход за глазами, полостью рта и носа

Глаза больного промываются 3 — 4 раза в день, для чего используются теплая кипяченая вода или 2% раствор натрия гидрокарбоната. После этого в глаза необходимо закапать по 1 — 2 капли 20% раствора сульфацил-натрия.

Нос очищается ватным тампоном, смоченным в теплом вазелиновом масле. При массивном образовании корочек в нос закапывают 2 — 3 капли вазелинового масла 3 — 4 раза в сутки.

Ротовая полость очищается после каждого приема пищи, для чего рот либо ополаскивается кипяченой водой, либо ребенку после еды дают попить кипяченую воду.

Рис. 15. Уход за глазами, полостью рта и носа — обязательный компонент ухода за больным корью ребенком.

Патогенетическое и симптоматическое лечение кори

Патогенетическая и симптоматическая терапия заболевания направлена на нормализацию температуры тела, борьбу с кашлем и аллергией.

Учитывая роль аллергического компонента в развитии заболевания, обязательным является назначение антигистаминных препаратов — Димедрола, Пипольфена, Тавегила или Супрастина.
При упорном кашле назначаются отхаркивающие средства. Показаны ингаляции со щелочными растворами, муколитиками и бронхолитиками. Из физиотерапевтических методов лечения показаны микроволновая и УВЧ-терапия на область грудной клетки.

Вирусологическая диагностика краснухи.

Вирус
краснухи относится к роду Rubivirus
семейства Rubiviridae
и вызывает у детей инфекцию с
пятнисто-папулезной сыпью, катаральным
воспалением верхних дыхательных путей,
увеличением шейных и затылочных
лимфатических узлов. В некоторых случаях
возникают тяжелые осложнения (серозный
менингит, энцефалит, полиневрит,
тромбоцитопения). У взрослых краснуха
протекает более тяжело; вирус обладает
тератогенным действием и у беременных
женщин (особенно в первом триместре)
вызывает врожденную краснуху с развитием
пороков сердца, органов зрения (катаракта,
глаукома и т.д.), органов слуха (глухонемота
и т.д.). Лабораторная диагностика
проводится только при осложнениях
краснухи, при подозрении на инфекцию у
беременных женщин и при расследовании
причин гибели плода или новорожденного
ребенка. Исследованию подвергают слизь
из носоглотки, кровь, мочу, кал, органы
трупа (селезенка, лимфатических узлы,
костный мозг, головной мозг). Применяются
следующие методы.

Вирусологический
метод —
заражение культур клеток (Vero,
PK-13
и др.) с последующей идентификацией
вируса с помощью РТГА или реакции
интерференции (сначала культуру клеток
заражают вирусом краснухи, не вызывающим
цитопатогенного действия, а затем
цитопатогенным вирусом везикулярного
стоматита (ВВС); при наличии искомого
вируса краснухи возникает интерференция
обоих вирусов и цитопатическое действие
ВВС не проявляется).

Серологический
метод –
обнаружение антител класса IgM
к вирусу краснухи (показатель свежего
инфицирования) в парных сыворотках
больных с помощью метода ИФА; применяется
также РТГА.

Генодиагностика.
Разработана ПЦР для выявления специфических
фрагментов РНК вируса краснухи,
оправданный для применения при диагностике
краснухи у женщин.

Источник

Для постановки диагноза корь зачастую необходимо лабораторное
подтверждение инфекции. Самое лучшее время для сдачи анализов — первый контакт
пациента с врачом. Врача необходимо вызывать на дом, так как корь — это заразное
заболевание и поход в поликлинику может стать причиной заражения многих восприимчивых
детей и взрослых. Забор материала для исследования может выполнить врач или
медсестра, которую доктор может прислать чуть позже.

1 больной корью может заразить 12—18 восприимчивых человек [1]. Подробнее в статье «Как можно заразиться корью?».

Стандартом лабораторной диагностики кори в большинстве стран
являются серологическое исследование и ПЦР-диагностика.

1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Суть метода заключается в идентификации РНК вируса кори в крови,
слизи носоглотки/ротоглотки, бронхиальном секрете или моче.

ПЦР-исследование рекомендуется проводить как можно раньше после
появления сыпи, так как количество вируса в организме снижается с течением
времени. Наиболее информативным является период первых 1—3—7 дней от начала
высыпаний [2—5]. В литературе имеются сведения о том, что у некоторых пациентов
вирус кори может определяться в носоглоточном секрете до 10—14 дня болезни [5].

Для наиболее точной диагностики рекомендуется производить забор
материала из трех разных локусов (кровь, мазок из носоглотки или ротоглотки и
моча). Это повышает вероятность правильного диагноза [4,5].

После забора материала для ПЦР (мазок и моча) допустимо его хранение
до 1 суток в холодильнике (4 °С), возможно замораживание. Если для исследования
используется моча, то ее объем должен быть не менее 10 мл, но лучше 50 мл. Утренняя
первая моча содержит максимальное количество вируса [4].

Отрицательный результат ПЦР не исключает диагноза кори [6].

Ложноотрицательный результат может быть получен при позднем заборе
материала (более 3—7 дней с момента появления сыпи), предшествующей недавней
вакцинации против кори, при нарушениях хранения и/или транспортировки образцов
[4,5].

В соответствии с международными рекомендациями при выполнении ПЦР
желательно определять генотип вируса кори. Это необходимо для четкого
различения происхождения вируса (дикий штамм или вакцинный), учета
распространения вируса по земному шару и происхождения очагов/вспышек
заболевания [4].

На сегодняшний день известно 24 генотипа вируса кори. Большинство
из них вышло из циркуляции, однако менее 10 из них (по данным ВОЗ — 6 [7]) все еще присутствуют на нашей планете [8].

2. Серологический метод.

Метод заключается в определении специфических антител (IgM и IgG) против вируса кори в сыворотке крови.

Для верификации диагноза кори достаточно определить один класс
антител IgM или IgG. Каковы особенности анализа?

— IgM.

IgM определяется в крови в течение 1 месяца (28 дней [3]) у больного
корью после появления высыпаний. Пик IgM отмечается
на 7—10 сутки от момента появления сыпи, а затем количество антител постепенно
снижается. Через 6—8 недель от начала сыпи IgM уже может не
определяться [9].

Если больной ранее прививался против кори (1 или 2 прививки) то
при реинфекции вирусом кори IgM у него может не определяться
вовсе или быть повышенным только короткий промежуток времени, который трудно
зафиксировать [6].

Отрицательный анализ на IgM не исключает наличие заболевания у ранее привитых.

В некоторых случаях у ранее не привитых пациентов IgM может быть ложноотрицательными
(около 20—25% проб). Это характерно для образцов, взятых в первые 72 часа от
начала появления сыпи. Дело в том, что концентрация антител в первые дни
болезни еще мала и недостаточна для определения [10,11].

Если результат был отрицательным и сыпь присутствует более 72
часов должен быть выполнен повторный анализ (допустимо выполнить анализ до 10
дня болезни) [6].

Кроме того, ложноотрицательный результат может быть получен, если анализ выполнен позже 28 дней с момента появления сыпи.

Ложноположительный результат возможен при проведенной ранней
вакцинации против кори (в течение предшествующих 6 недель до появления сыпи), наличии
повышенного ревматоидного фактора, при сопутствующих острых воспалительных
заболеваний [5].

В каждом отдельном случае проводится изучение течения заболевания,
особенностей пациента и/или дополнительная диагностика.

Наряду с определением IgM / IgG для диагностики кори, также настоятельно рекомендуется выполнять ПЦР [12].

Положительный анализ на IgM только при
наличии характерной клинической картины и данных о контакте с больным
корью свидетельствует об остром течении коревой инфекции. Положительный
анализ на IgM при отсутствии характерной клинической картины или контакта с
больным корью не является основанием для постановки диагноза. В таких случаях
рекомендуется выполнить ПЦР исследование [3].

— IgG.

Определение IgG является информативным анализом
для подтверждения кори в случае отсутствия возможности провести ПЦР
исследование и/или когда IgM является отрицательным или
сомнительным [6].

Исследование проводится в парных сыворотках: первый анализ должен
быть выполнен в первые 4—7 дней от начала высыпаний, второй — в течение 10—30
дней после первого [2,3].

IgG достигают пика через 4 недели от начала сыпи [9].

Положительным результат считается, если:

— произошла сероконверсия (в первом анализе IgG
отрицательны, во втором — положительны);

— отмечается значительное (в 4 и более раз) повышение уровня IgG.

Сероконверсия не является информативной при недавно проведенной
вакцинации (в течение предшествующих 6 недель).

Ранее вакцинированные, получившие две прививки и не выработавшие
защитных антител (такое встречается, но очень редко), при заболевании корью
могут не иметь повышение IgG в 4 раза при втором анализе IgG по сравнению
с первым [3]. Отрицательное значение IgG в двух
анализах исключает наличие коревой инфекции.

ИФА — метод, одобренный ВОЗ для определения IgG и IgM для диагностики коревой инфекции [10].

3. Вирусологический метод.

Для идентификации вируса кори иногда может применяться вирусологический метод. Суть его заключается в том, что вирус, полученный от больного, культивируется в клеточной культуре. Этот метод является особо точным, но занимает около двух недель. Вирусологический метод не рекомендуется для рутинного обследования при подозрении на корь [2,5,6,8].