Забор крови на корь
Корь – высококонтагиозное антропонозное острое инфекционное заболевание с воздушно-капельным путем передачи. Возбудитель кори – РНК содержащий вирус (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus). Только 1% восприимчивых лиц не заболевает корью при первом тесном контакте с больным.
Корь начинается с продромального периода, для которого характерны повышение температуры тела до 38°С и выше, кашель, насморк, чихание, покраснение глаз и светобоязнь, энантема в полости рта (пятна Филатова-Коплика). С 4-5 дня болезни наблюдается поэтапное высыпание пятнисто-папулезной сыпи (на первый день сыпь появляется на лице и шее, на второй день – на туловище, на третий день – на ногах и руках), на месте сыпи остается пигментация и отрубевидное шелушение. Инкубационный период длится в среднем около 10 дней (от 7 до 18 дней) с момента инфицирования дыхательных путей и до повышения температуры.
Несмотря на наличие доступных высокоиммуногенных вакцин, корь все еще остается одной из основных причин детской смертности в развивающихся странах и периодически приводит к возникновению крупных вспышек в индустриально развитых странах. В 2010-2011 годах крупные вспышки кори были зарегистрированы в ряде стран Африки, Юго-Восточной Азии и Европы (Франция, Германия, Болгария, Румыния). Особенно тревожная ситуация сложилась в 2012 году на Украине, где за три месяца заболело более 10000 человек. В Российской Федерации, большинство административных территорий которой в январе 2011 года были сертифицированы на отсутствие эндемичной кори, ситуация осложнилась в 2011-2012 годах в Южном и Северокавказском Федеральных округах, в Москве, Санкт-Петербурге и ряде других городов.
Вирус кори присутствует в крови, носоглоточных выделениях и моче во время продромального периода и в течение 3-4 дней с момента появления сыпи. АТ к вирусу кори впервые можно обнаружить в крови с момента появления сыпи. Максимальный уровень содержания АТ IgM в крови приходится на 4-7 дни после появления сыпи, они сохраняются в течение 28 дней, в редких случаях их можно обнаружить спустя 8 недель с момента появлении сыпи. АТ IgG начинают вырабатываться с момента появления сыпи и достигают максимального уровня через 2 недели; их можно выявить в течение долгих лет после перенесенной инфекции.
Показания к обследованию. Больные с диагнозом «корь», «корь ?» и с другими клиническими диагнозами, имеющие пятнисто-папулезную сыпь и температуру тела 37,5°С и выше.
Дифференциальная диагностика. Заболевания, протекающие с мелкопятнистой экзантемой (краснуха, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, лекарственные и аллергические экзантемы, протекающие с повышением температуры тела).
Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение вируса кори, выявление РНК вируса кори, обнаружение АТ к вирусу кори.
Материал для исследования
- Сыворотка крови – выявление АТ;
- моча, назофарингиальные смывы, лимфоциты периферической крови – выделение вируса кори;
- мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление РНК вируса.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Лабораторная диагностика коревой инфекции в рамках Программы элиминации кори в РФ проводится только в вирусологических лабораториях Региональных центров по эпидемиологическому надзору за корью с помощью тест-систем, рекомендованных ВОЗ. Для лабораторной диагностики кори применяют главным образом выявление АТ к вирусу (серологическая диагностика). Для диагностики кори используют как обнаружение АТ отдельных классов (IgM и IgG), так и количественное определение специфических АТ в крови для установления их значимого прироста при одновременном исследовании двух проб, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции (парные сыворотки).
Для выявления вирусоспецифических АТ IgM и IgG в настоящее время используется преимущественно метод ИФА. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, простоте и скорости выполнения, возможности автоматизации исследования, метод доступен любой лаборатории. Для получения корректных результатов и облегчения их интерпретации большое значение имеет правильно выбранное по отношению к появлению клинических симптомов кори время забора образца.
Для выявления изменения уровня суммарных АТ с использованием реакции нейтрализации (РН) цитопатического действия вируса кори, требуется наличие двух образцов сыворотки крови, взятых у больного в остром периоде заболевания и на стадии реконвалесценции. Метод обладает 100% чувствительностью по отношению к клинически подтвержденным случаям. Этот тест не является легким в применении, потому что он требует наличия высококвалифицированного персонала, имеющего опыт работы с культурами клеток. Результаты анализа могут быть получены через 10 дней после получения сыворотки реконвалесцента.
Оценка изменения содержания специфических АТ с использованием метода РТГА также требует наличия двух образцов сыворотки крови, полученных у больного в остром периоде и на стадии реконвалесценции. У вакцинированных лиц метод демонстрирует 98% чувствительность. Этот тест также не является легким в применении, потому что требует высококвалифицированного персонала, а также наличие свежих эритроцитов обезьян. Результаты анализа могут быть получены через 2 дня после получения сыворотки реконвалесцента.
Выделение вируса кори выполняют на культуре клеток Vero. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток может занять несколько недель, поэтому не рекомендуется использовать этот метод для первичной диагностики инфекции, изоляция вируса кори проводится в специализированных лабораториях.
Выявление РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией не получило пока широкого распространения. Секвенирование генома вируса кори применяется в целях определения генотипа возбудителя кори. Генетический анализ позволяет сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы, что позволяет получить информацию о происхождении вирусов и проследить пути их передачи.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Для диагностики кори ВОЗ рекомендует использовать обнаружение вирус-специфических IgM методом ИФА в образце сыворотки крови, взятом после четвертого дня от момента появления сыпи. Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи.
При выявлении АТ IgМ к вирусу кори у пациентов с лихорадкой и пятнистопапулезной сыпью, обследуемых в рамках активного эпидемиологического надзора за корью, дополнительно проводится исследование для выявления АТ IgG методом ИФА в «парных сыворотках». Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи (1-я сыворотка) и не ранее чем через 10-14 дней от даты взятия первой пробы (2-я сыворотка).
Для определения напряженности иммунитета к вирусу кори ВОЗ рекомендует применять выявление АТ IgG в сыворотке крови методом ИФА.
Для выявления вируса кори и его РНК используют биоматериалы, взятые в продромальный период заболевания и в первые три дня после появления сыпи. При взятии образцов следует учитывать, что интенсивность экскреции вируса быстро падает.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Вирусоспецифические АТ IgM появляются в течение первых дней с момента высыпания, спустя месяц их уровень начинает быстро снижаться. Их наличие в крови пациента достоверно свидетельствует об острой свежей инфекции. АТ IgM также вырабатываются при первичной вакцинации и, хотя их уровень снижается быстрее, чем уровень АТ IgM, вырабатывающихся в ответ на инфицирование диким вирусом, специфические АТ IgM к дикому или вакцинному вирусу не могут быть разделены используемыми в рутинной диагностике методами. В этом случае для интерпретации полученных результатов следует обратиться к истории вакцинации конкретного пациента.
Поскольку исследование АТ IgM методом ИФА обладает максимальной чувствительностью между 4-м и 28-м днями от момента появления сыпи, то исследование образца крови, полученного в эти сроки, считается адекватным для диагностики кори. Повторное взятие образца крови может понадобиться в случае отрицательного результата выявления АТ IgM в первом образце крови, полученном в течение первых трех дней от момента появления сыпи. Повторное взятие крови для выявления АТ IgG выполняют через 10-14 дней после взятия первого. Нарастание титра специфических АТ IgG в 4 и более раза при одновременном исследовании обеих проб с использованием стандартных тестов является основанием для постановки диагноза «корь».
Источник
Корью называется острая инфекция вирусной природы, которая может сопровождаться такими тяжелыми симптомами, как пневмония, температура равная 39–41 °C, воспаление верхних дыхательных путей, общая слабость, экзантема и т. д. В некоторых случаях люди становятся инвалидами или же погибают от осложнений.
Согласно медицинским данным, иммунитет к кори имеет возможность полноценно сформироваться лишь после фактического перенесения человеком недуга, а прививки в подавляющем большинстве случаев не только не способствуют образованию антител по отношению к вирусу, но и нередко ослабляют защитные барьеры организма. Для того чтобы выявить инфекционную болезнь, а также подтвердить наличие или отсутствие должной иммунной реакции на нее, специалисты применяют анализ крови на антитела к кори. В чем же состоит его особенность?
Значимость антител для человека
Когда вирус кори (морбилливирус), преодолевая естественные защитные барьеры организма, попадает во внутреннюю среду, он придается активному размножению и распространению. В это же время иммунная система производит необходимое количество защитных белков – антител: вырабатываемые структуры обнаруживают инородные клетки, входят с ними в контакт и купируют их развитие. Если организм изначально имел в наличии большое количество иммуноглобулинов, то процесс его очистки от враждебных тел пройдет как можно быстрее без каких-либо осложнений.
Принцип действия защитной реакции на вирусное вторжение основывается на так называемой системе «замочка и ключика». Иммунитет не только продуцирует необходимое количество антител, но и придает им уникальную структуру, которая позволяет оборонительным белкам подобно ключам «встраиваться» в соответствующие скважины замочков инфекционных агентов и подвергать их ликвидации.
Также следует отметить хорошую память белков: столкнувшись ранее с врагом, они навсегда запоминают их «внешний вид», что позволяет им при повторной попытке захвата моментально среагировать на опасность, ликвидируя болезнь еще до её начала. А поскольку возбудитель кори не подвергается практически никаким изменениям, «лицо» вируса будет на протяжении всей жизни человека идентифицироваться его защитной системой и незамедлительно атаковываться.
Так как чаще всего во время первого заболевания корью антитела вырабатываются организмом не столь быстро, во время иммунной реакции повышается вероятность заражения окружающих людей воздушно-капельным путем.
Детальное строение морбилливируса – возбудителя кори
В каких случаях проводится исследование?
Анализ крови на соответствующие иммуноглобулины делается, в первую очередь, людям, у которых во время комплексного обследования были диагностированы подобные симптомы или совокупность таковых:
- Боли в области горла.
- Слезотечение.
- Сухой кашель.
- Лихорадка.
- Стоматит.
- Конъюнктивит.
- Зудящая сыпь на поверхности кожного покрова.
- Температура, поднимающаяся выше 38-39° C.
- Покраснение глаз.
- Боязнь света.
- Тахикардия.
- Пристеночное дыхание.
- Истощение организма.
- Ангина.
- Эпидермальная пигментация.
- Потеря аппетита.
- Интоксикация.
- Артериальная гипотензия (пониженное АД).
- Гиперемия.
- Чихание.
- Отечность век.
- Отит.
- Красноватые и белесые пятна на нёбе.
- Непрекращающиеся головные боли.
- Суставная боль.
- Ринит (насморк).
- Видоизменение голоса, его осиплость.
- Энцефалит.
- Выраженные хрипы при дыхании.
СПИД, значительно ослабевая иммунную систему человека, нередко способствует беспрепятственному проникновению морбилловируса в организм. Исследование крови на напряженность иммунитета к кори часто просят сдать детей и подростков при введении карантинного режима на территории учебных учреждений. Помимо прочего, существуют так называемые факторы риска, которые тоже могут способствовать назначению анализа на иммуноглобулины.
Если говорить о том, сколько их существует на данный момент, стоит выделить наиболее значимые из них:
- Проживание в условиях крайней антисанитарии.
- Посещение государств, в которых вирусное заболевание является распространенным явлением.
- Общее снижение уровня иммунитета.
Люди, страдающие от последствий дефицита витамина A, также попадают в группу риска: на фоне признаков авитаминоза (куриной слепоты, сухости кожи и пр.) у них могут параллельно проявляться симптомы опасной инфекции. Поэтому при хроническом недостатке ретинола следует немедленно посетить врача с целью восстановления защитных барьеров организма.
Следует помнить о том, что кори в большинстве случаев подвергаются те, кто напрямую контактировал с больными людьми.
Подготовка к анализу
Подготовка к диагностике титров нарастания антител подразумевает всего несколько крайне важных требований. Следует минимум за сутки до исследования минимизировать тяжелые физические нагрузки. За 2 недели до того, как сдавать кровь на корь, требуется обязательная консультация со специалистом относительно дальнейшего употребления каких-либо лекарственных средств. Необходимо постараться удерживать положительный психологический настрой, не поддаваясь панике и стрессу.
За 24–48 часов стоит исключить распитие энергетиков и алкогольных напитков. Нужно отложить на полноценный сон накануне диагностики примерно 7–8 часов – на прием к врачу следует приходить выспавшимися и отдохнувшими. За 8–10 часов до анализа крови рекомендуется употребить последний прием пищи: сбор биоматериала осуществляется на пустой желудок.
Медики советуют не проходить лабораторное исследование сразу после каких-либо физиотерапевтических процедур, колоноскопии, МРТ, рентгена, компьютерной томографии или флюорографии. Последний прием еды перед исследованием должен быть максимально простым и нежирным: лучше всего приготовить крем-суп, запеченные овощи или легкий салат. Когда до медицинской манипуляции останется 10–20 минут, пациенту потребуется присесть на свободную скамью в коридоре и немного передохнуть после спешной дороги.
Техника проведения
Для того чтобы диагностика показала достоверный результат, а также не нанесла урон здоровью человека, её следует выполнять согласно установленным инструкциям, предполагающим следующий порядок действий:
- Пациент заходит в оборудованное помещение и усаживается на кушетку, располагающуюся около манипуляционного столика.
- Специалист подготавливает необходимые стерильные ёмкости, маркирует их, указывая также личные данные конкретного человека и подписывает направление в лабораторию, с дальнейшим занесением очередной заметки в журнал.
- Одну из рук пациента укладывают в разогнутом состоянии на стол так, чтобы ладонь была направлена к потолку, кладут под локоть небольшой валик.
- На нижнюю часть плеча накладывают жгут из резины или иной материи, проверяя наличие пульса близь запястья.
- Кожу над локтевой веной обрабатывают с помощью медицинского спирта, затем просят пациента интенсивно чередовать сжимания и разжимания кулака для лучшего насыщения сосудов кровью.
- Когда игла вакуумной системы или одноразового шприца будет введена в вену под углом в 25 градусов, лаборант аккуратно подкорректирует направление иглы, расположив её параллельно сосудистым стенкам.
- Далее производится забор необходимого количества крови, которая должна обладать бордовым (темно-красным) оттенком.
- К месту прокола прижимают ватный диск, одновременно извлекая из вены иглу, после чего с плеча снимают жгут.
- На протяжении минимум 5 минут пациенту нужно неподвижно держать руку в согнутом состоянии, для того чтобы в области пункции образовался тромб (кровяной сгусток): он закупорит сосуд и предотвратит дальнейшую потерю крови.
Если локтевая вена при первичном осмотре практически не наблюдается (т.е. глубоко залегает), тогда специалист может взять пробу из вен нижней части конечности: кисти или запястья.
Схема забора биоматериала из вены
Специфика лабораторного исследования
Данный анализ крови на корь предполагает исследование двух типов иммуноглобулинов – M и G. Антитела первого типа вырабатываются иммунной системой в острой фазе инфекционного заболевания. На протяжении последующего месяца их уровень значительно повышается, а потом начинает падать, стремясь к нулю. Можно сказать, что IgM является непостоянным параметром, проявление которого сигнализирует о наличии возбудителя кори. После излечения, эта белковая структура исчезает.
Иммуноглобулин G появляется следом за IgM, его концентрация также начинает временно увеличиваться до определенной отметки. В отличие от своего собрата IgG, после перенесения человеком вирусной патологии, остается в крови на постоянной основе, свидетельствуя о том, что пациент когда-то заболевал инфекцией и в последствие приобрел стойкий иммунитет к кори. Крайне часто по окончании лабораторного исследования на руки пациенту выдают 2 бланка результатов
Дело в том, что врачи предпочитают подходить к важному обследованию комплексно, поэтому в большинстве случаев серологическая диагностика иммуноглобулинов производится в совокупности с общим анализом крови. ОАК позволяет специалистам выявить корь по состоянию наиболее значимых элементов крови – моноцитов, лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов. Последние форменные элементы в письменной расшифровке анализа скрываются под термином СОЭ – скоростью оседания эритроцитов.
Принципы расшифровки результатов
Анализ крови на иммуноглобулины не имеет классических стандартов содержания IgG и IgM, так как каждая лаборатория устанавливает собственные параметры нормы. Как правило, допустимые значения антител указаны в бланке рядом с результатами диагностики, поэтому пациент сам может методом сравнения установить частичный диагноз. Если цифирные обозначения личных данных ниже нормы – речь идет об отрицательном показателе, если выше нормы – тогда о положительном.
Рядом с каждым параметром для удобства можно аккуратно нарисовать «+» или «-» в зависимости от вычислений, затем приступить к сопоставлению результатов:
| Наименование иммуноглобулинов | Расшифровка значений | |
| IgM | IgG | |
| — | — | Пациент никогда не заболевал корью ранее, антитела к инфекции отсутствуют. Если имел место быть контакт с больным человеком, необходимо повторить процедуру, так как вероятно наличие инкубационного бессимптомного периода. |
| — | + | В крови имеются устойчивые защитные белки, которые образовались во время перенесения кори или в редких случаях при введении вакцины. |
| + | — | Наблюдается начальная стадия вирусного заболевания. |
| + | + | Наличие положительных IgG и IgM свидетельствует об острой фазе кори. Иногда подобная картина видна и на последнем этапе недуга. |
В результатах общего анализа крови при кори будет наблюдаться снижение количества нейтрофилов, лейкоцитов, моноцитов, эозинофилов (могут отсутствовать) и лимфоцитов. Показатель СОЭ, в свою очередь, немного повышен. Анализы крови на антитела к кори никогда, при правильном подходе к обследованию, не берутся самостоятельно в отсутствии уточняющих методов диагностики.
Поэтому до окончательного объявления диагноза не следует поддаваться тревожным ощущениям. Если пациент будет выполнять предписания специалиста, следовать намеченному плану лечения и восстановления, тогда вероятность благоприятного исхода повышается в несколько раз.
Источник
