Обязательно ли лабораторное подтверждение диагноза кори

Для постановки диагноза корь зачастую необходимо лабораторное
подтверждение инфекции. Самое лучшее время для сдачи анализов — первый контакт
пациента с врачом. Врача необходимо вызывать на дом, так как корь — это заразное
заболевание и поход в поликлинику может стать причиной заражения многих восприимчивых
детей и взрослых. Забор материала для исследования может выполнить врач или
медсестра, которую доктор может прислать чуть позже.

1 больной корью может заразить 12—18 восприимчивых человек [1]. Подробнее в статье «Как можно заразиться корью?».

Стандартом лабораторной диагностики кори в большинстве стран
являются серологическое исследование и ПЦР-диагностика.

1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Суть метода заключается в идентификации РНК вируса кори в крови,
слизи носоглотки/ротоглотки, бронхиальном секрете или моче.

ПЦР-исследование рекомендуется проводить как можно раньше после
появления сыпи, так как количество вируса в организме снижается с течением
времени. Наиболее информативным является период первых 1—3—7 дней от начала
высыпаний [2—5]. В литературе имеются сведения о том, что у некоторых пациентов
вирус кори может определяться в носоглоточном секрете до 10—14 дня болезни [5].

Для наиболее точной диагностики рекомендуется производить забор
материала из трех разных локусов (кровь, мазок из носоглотки или ротоглотки и
моча). Это повышает вероятность правильного диагноза [4,5].

После забора материала для ПЦР (мазок и моча) допустимо его хранение
до 1 суток в холодильнике (4 °С), возможно замораживание. Если для исследования
используется моча, то ее объем должен быть не менее 10 мл, но лучше 50 мл. Утренняя
первая моча содержит максимальное количество вируса [4].

Отрицательный результат ПЦР не исключает диагноза кори [6].

Ложноотрицательный результат может быть получен при позднем заборе
материала (более 3—7 дней с момента появления сыпи), предшествующей недавней
вакцинации против кори, при нарушениях хранения и/или транспортировки образцов
[4,5].

В соответствии с международными рекомендациями при выполнении ПЦР
желательно определять генотип вируса кори. Это необходимо для четкого
различения происхождения вируса (дикий штамм или вакцинный), учета
распространения вируса по земному шару и происхождения очагов/вспышек
заболевания [4].

На сегодняшний день известно 24 генотипа вируса кори. Большинство
из них вышло из циркуляции, однако менее 10 из них (по данным ВОЗ — 6 [7]) все еще присутствуют на нашей планете [8].

2. Серологический метод.

Метод заключается в определении специфических антител (IgM и IgG) против вируса кори в сыворотке крови.

Для верификации диагноза кори достаточно определить один класс
антител IgM или IgG. Каковы особенности анализа?

IgM.

IgM определяется в крови в течение 1 месяца (28 дней [3]) у больного
корью после появления высыпаний. Пик IgM отмечается
на 7—10 сутки от момента появления сыпи, а затем количество антител постепенно
снижается. Через 6—8 недель от начала сыпи IgM уже может не
определяться [9].

Если больной ранее прививался против кори (1 или 2 прививки) то
при реинфекции вирусом кори IgM у него может не определяться
вовсе или быть повышенным только короткий промежуток времени, который трудно
зафиксировать [6].

Отрицательный анализ на IgM не исключает наличие заболевания у ранее привитых.

В некоторых случаях у ранее не привитых пациентов IgM может быть ложноотрицательными
(около 20—25% проб). Это характерно для образцов, взятых в первые 72 часа от
начала появления сыпи. Дело в том, что концентрация антител в первые дни
болезни еще мала и недостаточна для определения [10,11].

Читайте также:  Не зная что беременна сделала прививку от кори

Если результат был отрицательным и сыпь присутствует более 72
часов должен быть выполнен повторный анализ (допустимо выполнить анализ до 10
дня болезни) [6].

Кроме того, ложноотрицательный результат может быть получен, если анализ выполнен позже 28 дней с момента появления сыпи.

Ложноположительный результат возможен при проведенной ранней
вакцинации против кори (в течение предшествующих 6 недель до появления сыпи), наличии
повышенного ревматоидного фактора, при сопутствующих острых воспалительных
заболеваний [5].

В каждом отдельном случае проводится изучение течения заболевания,
особенностей пациента и/или дополнительная диагностика.

Наряду с определением IgM / IgG для диагностики кори, также настоятельно рекомендуется выполнять ПЦР [12].

Положительный анализ на IgM только при
наличии характерной клинической картины и данных о контакте с больным
корью свидетельствует об остром течении коревой инфекции. Положительный
анализ на IgM при отсутствии характерной клинической картины или контакта с
больным корью не является основанием для постановки диагноза. В таких случаях
рекомендуется выполнить ПЦР исследование [3]. 

IgG.

Определение IgG является информативным анализом
для подтверждения кори в случае отсутствия возможности провести ПЦР
исследование и/или когда IgM является отрицательным или
сомнительным [6].

Исследование проводится в парных сыворотках: первый анализ должен
быть выполнен в первые 4—7 дней от начала высыпаний, второй — в течение 10—30
дней после первого [2,3].

IgG достигают пика через 4 недели от начала сыпи [9].

Положительным результат считается, если:

— произошла сероконверсия (в первом анализе IgG
отрицательны, во втором — положительны);

— отмечается значительное (в 4 и более раз) повышение уровня IgG.

Сероконверсия не является информативной при недавно проведенной
вакцинации (в течение предшествующих 6 недель).

Ранее вакцинированные, получившие две прививки и не выработавшие
защитных антител (такое встречается, но очень редко), при заболевании корью
могут не иметь повышение IgG в 4 раза при втором анализе IgG по сравнению
с первым [3]. Отрицательное значение IgG в двух
анализах исключает наличие коревой инфекции.

ИФА — метод, одобренный ВОЗ для определения IgG и IgM для диагностики коревой инфекции [10].

3. Вирусологический метод.

Для идентификации вируса кори иногда может применяться вирусологический метод. Суть его заключается в том, что вирус, полученный от больного, культивируется в клеточной культуре. Этот метод является особо точным, но занимает около двух недель. Вирусологический метод не рекомендуется для рутинного обследования при подозрении на корь [2,5,6,8].

Источник

Корь – высококонтагиозное антропонозное острое инфекционное заболевание с воздушно-капельным путем передачи. Возбудитель кори – РНК содержащий вирус (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus). Только 1% восприимчивых лиц не заболевает корью при первом тесном контакте с больным.

Корь начинается с продромального периода, для которого характерны повышение температуры тела до 38°С и выше, кашель, насморк, чихание, покраснение глаз и светобоязнь, энантема в полости рта (пятна Филатова-Коплика). С 4-5 дня болезни наблюдается поэтапное высыпание пятнисто-папулезной сыпи (на первый день сыпь появляется на лице и шее, на второй день – на туловище, на третий день – на ногах и руках), на месте сыпи остается пигментация и отрубевидное шелушение. Инкубационный период длится в среднем около 10 дней (от 7 до 18 дней) с момента инфицирования дыхательных путей и до повышения температуры.

Несмотря на наличие доступных высокоиммуногенных вакцин, корь все еще остается одной из основных причин детской смертности в развивающихся странах и периодически приводит к возникновению крупных вспышек в индустриально развитых странах. В 2010-2011 годах крупные вспышки кори были зарегистрированы в ряде стран Африки, Юго-Восточной Азии и Европы (Франция, Германия, Болгария, Румыния). Особенно тревожная ситуация сложилась в 2012 году на Украине, где за три месяца заболело более 10000 человек. В Российской Федерации, большинство административных территорий которой в январе 2011 года были сертифицированы на отсутствие эндемичной кори, ситуация осложнилась в 2011-2012 годах в Южном и Северокавказском Федеральных округах, в Москве, Санкт-Петербурге и ряде других городов.

Читайте также:  Вред от прививки кори

Вирус кори присутствует в крови, носоглоточных выделениях и моче во время продромального периода и в течение 3-4 дней с момента появления сыпи. АТ к вирусу кори впервые можно обнаружить в крови с момента появления сыпи. Максимальный уровень содержания АТ IgM в крови приходится на 4-7 дни после появления сыпи, они сохраняются в течение 28 дней, в редких случаях их можно обнаружить спустя 8 недель с момента появлении сыпи. АТ IgG начинают вырабатываться с момента появления сыпи и достигают максимального уровня через 2 недели; их можно выявить в течение долгих лет после перенесенной инфекции.

Показания к обследованию. Больные с диагнозом «корь», «корь ?» и с другими клиническими диагнозами, имеющие пятнисто-папулезную сыпь и температуру тела 37,5°С и выше.

Дифференциальная диагностика. Заболевания, протекающие с мелкопятнистой экзантемой (краснуха, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, лекарственные и аллергические экзантемы, протекающие с повышением температуры тела).

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение вируса кори, выявление РНК вируса кори, обнаружение АТ к вирусу кори.

Материал для исследования

  • Сыворотка крови – выявление АТ;
  • моча, назофарингиальные смывы, лимфоциты периферической крови – выделение вируса кори;
  • мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление РНК вируса.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Лабораторная диагностика коревой инфекции в рамках Программы элиминации кори в РФ проводится только в вирусологических лабораториях Региональных центров по эпидемиологическому надзору за корью с помощью тест-систем, рекомендованных ВОЗ. Для лабораторной диагностики кори применяют главным образом выявление АТ к вирусу (серологическая диагностика). Для диагностики кори используют как обнаружение АТ отдельных классов (IgM и IgG), так и количественное определение специфических АТ в крови для установления их значимого прироста при одновременном исследовании двух проб, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции (парные сыворотки).

Для выявления вирусоспецифических АТ IgM и IgG в настоящее время используется преимущественно метод ИФА. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, простоте и скорости выполнения, возможности автоматизации исследования, метод доступен любой лаборатории. Для получения корректных результатов и облегчения их интерпретации большое значение имеет правильно выбранное по отношению к появлению клинических симптомов кори время забора образца.

Для выявления изменения уровня суммарных АТ с использованием реакции нейтрализации (РН) цитопатического действия вируса кори, требуется наличие двух образцов сыворотки крови, взятых у больного в остром периоде заболевания и на стадии реконвалесценции. Метод обладает 100% чувствительностью по отношению к клинически подтвержденным случаям. Этот тест не является легким в применении, потому что он требует наличия высококвалифицированного персонала, имеющего опыт работы с культурами клеток. Результаты анализа могут быть получены через 10 дней после получения сыворотки реконвалесцента.

Читайте также:  Реакция на корь в казахстане

Оценка изменения содержания специфических АТ с использованием метода РТГА также требует наличия двух образцов сыворотки крови, полученных у больного в остром периоде и на стадии реконвалесценции. У вакцинированных лиц метод демонстрирует 98% чувствительность. Этот тест также не является легким в применении, потому что требует высококвалифицированного персонала, а также наличие свежих эритроцитов обезьян. Результаты анализа могут быть получены через 2 дня после получения сыворотки реконвалесцента.

Выделение вируса кори выполняют на культуре клеток Vero. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток может занять несколько недель, поэтому не рекомендуется использовать этот метод для первичной диагностики инфекции, изоляция вируса кори проводится в специализированных лабораториях.

Выявление РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией не получило пока широкого распространения. Секвенирование генома вируса кори применяется в целях определения генотипа возбудителя кори. Генетический анализ позволяет сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы, что позволяет получить информацию о происхождении вирусов и проследить пути их передачи.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Для диагностики кори ВОЗ рекомендует использовать обнаружение вирус-специфических IgM методом ИФА в образце сыворотки крови, взятом после четвертого дня от момента появления сыпи. Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи.

При выявлении АТ IgМ к вирусу кори у пациентов с лихорадкой и пятнистопапулезной сыпью, обследуемых в рамках активного эпидемиологического надзора за корью, дополнительно проводится исследование для выявления АТ IgG методом ИФА в «парных сыворотках». Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи (1-я сыворотка) и не ранее чем через 10-14 дней от даты взятия первой пробы (2-я сыворотка).

Для определения напряженности иммунитета к вирусу кори ВОЗ рекомендует применять выявление АТ IgG в сыворотке крови методом ИФА.

Для выявления вируса кори и его РНК используют биоматериалы, взятые в продромальный период заболевания и в первые три дня после появления сыпи. При взятии образцов следует учитывать, что интенсивность экскреции вируса быстро падает.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Вирусоспецифические АТ IgM появляются в течение первых дней с момента высыпания, спустя месяц их уровень начинает быстро снижаться. Их наличие в крови пациента достоверно свидетельствует об острой свежей инфекции. АТ IgM также вырабатываются при первичной вакцинации и, хотя их уровень снижается быстрее, чем уровень АТ IgM, вырабатывающихся в ответ на инфицирование диким вирусом, специфические АТ IgM к дикому или вакцинному вирусу не могут быть разделены используемыми в рутинной диагностике методами. В этом случае для интерпретации полученных результатов следует обратиться к истории вакцинации конкретного пациента.

Поскольку исследование АТ IgM методом ИФА обладает максимальной чувствительностью между 4-м и 28-м днями от момента появления сыпи, то исследование образца крови, полученного в эти сроки, считается адекватным для диагностики кори. Повторное взятие образца крови может понадобиться в случае отрицательного результата выявления АТ IgM в первом образце крови, полученном в течение первых трех дней от момента появления сыпи. Повторное взятие крови для выявления АТ IgG выполняют через 10-14 дней после взятия первого. Нарастание титра специфических АТ IgG в 4 и более раза при одновременном исследовании обеих проб с использованием стандартных тестов является основанием для постановки диагноза «корь».

Источник